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小鼠脑肠肽(BGP/Gehrelin)ELISAkit试剂盒技术说明 The little mouse gut peptides (BGP/Gehrelin) ELISAkit operating instructions 检测标本标本：血清或血浆/本产品仅供科研使用 脑肠肽(BGP/Gehrelin)ELISAkit试剂盒样本处理及要求：1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。5. 组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。6. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。7. 不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。 上海古朵脑肠肽(BGP/Gehrelin)ELISAkit试剂盒组成： 试剂盒组成 48孔配置 96孔配置 保存 说明书 1份 1份 ? 封板膜 2片（48） 2片（96） ? 密封袋 1个 1个 ? 酶标包被板 1×48 1×96 2-8℃保存 标准品：18pmol/L 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃保存 标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶 2-8℃保存 酶标试剂 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存 样品稀释液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存 显色剂A液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存 显色剂B液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存 终止液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存 浓缩洗涤液 （20ml×20倍）×1瓶 （20ml×30倍）×1瓶 2-8℃保存 小鼠脑肠肽(BGP/Gehrelin)ELISAkit试剂盒技术说明剂盒所含试剂： 试剂 A 通透液：0.1% Triton-X 100?? 10 mL（选用） 试剂 B 封闭缓冲液（封闭用） 20 mL 试剂 C （原装进口分装）已稀释的即用型 CD40 一抗（2.5ml） 试剂 D （原装进口分装）生物素化羊抗兔 IgG 1 支 （浓度 1.5 mg/mL，稀释比为 1:300~1:500）50 μL+抗体稀释液 20ml 试剂 E HRP-SA 复合物 1 支（浓度 1 μM，稀释比 1:50~1:200）100 μL试剂 F DAB 显色液 5ml 用户自备试剂：1． 10mM TBS（pH7.2~7.4） 三羟基氨基甲烷 1.21g 加蒸馏水 800mL，浓盐酸调 pH 值至 7.2~7.4，最后定容至 1000mLTBS-T：TBS+Tween 20（0.05%体积比） 2．抗原修复液（依检测抗原不同而选择不同的修复液）10mM pH6.0 柠檬酸缓冲柠檬酸 0.38g柠檬酸三钠 2.45g加蒸馏水 900mL，浓盐酸调 pH 值至 6.0，最后定容至 1000mL或：0.5M EDTA 修复液（pH8.0）EDTA·2H2O 186.1g蒸馏水 700mL，用 10mM NaOH 调 pH 值至 8.0，最后定容至 1000Ml 3. 缓冲甘油封固剂 10 mL 4. Tween 20 5 mL 石蜡包埋组织切片免疫染色实验步骤（建议方案???? ）： 石蜡包埋组织切片 3~4μm 厚度 1.烤片： 将待做切片置于切片架上，于 60℃恒温烤箱中至少烤 1 hr； 2.脱蜡： 切片放入盛有二甲苯的容器中脱蜡 3 次（即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），每次10 min； 3.水化： 切片经下行酒精水化，无水乙醇 5min，95