细胞自噬及相关因子在老年肝外伤中的表达及意义.pdfVIP

• 5 7 6 • Chinese H epatology, July. 2016’Vol. 2 1 ,No. 7 • 临 床 与 基 础 研 究 • 细胞自噬及相关因子在老年肝外伤 中的表达及意义 滕 旭 许 赤 孟 炜 李 晓 华 【摘 要 】 目 的 研 究 细 胞 自 噬 及 相 关 因 子 在 老 年 肝 外 伤 中 的 表 达 ，探 讨 在 老 年 肝 脏 缺 血 再 灌 注 损 伤 中 诱 导 老 年 肝 细 胞 自 噬 的 分 子 机 制 。方 法 选 取 不 同 鼠 龄 的 大 鼠 ，建 立 老 年 大 鼠 肝 外 伤 缺 血 再 灌 注 损 伤 的 模 型 ，通 过 采 用 电 子 显 微 镜 、免 疫 印 迹 和 荧 光 显 微 镜 等 方 法 观 察 细 胞 自 噬 与 细 胞 凋 亡 ，研 究 因 子 B c l-2 及 B ed in 1 在 细 胞 自 噬 / 细 胞 凋 亡 之 间 的 调 控 关 系 。 结 果 B ed in 1 在 老 年 大 鼠 肝 外 伤 再 灌 注 期 表 达 明 显 增 多 ，而 B c l-2 的 表 达 下 调 （P 0 . 0 1 ) ，B c l-2 和 B ed in 1 平 衡 状 态 失 调 ，免 疫 印 迹 表 明 B ed in 1 阳 性 细 胞 百 分 率 ( 4 〇. 8 ± 1 0 . 6 ) % 与 B d -2 (1 7 . 6 ± 5 . 2 ) % 比 较 差 异 有 统 计 学 意 义 （P 0 . 0 1 ) ，而 在 中 晚 期 阶 段 （外 伤 后 3 〜 6 月 ），B d - 2 表 达 下 调 的 作 用 减 缓 ，同 时 也 激 活 B ed in 1 激 活 自 噬 ，此 时 年 轻 大 鼠 与 老 年 大 鼠 的 肝 功 能 检 测 及 病 理 切 片 检 查 差 异 不 大 （P 0 . 0 1 ) 。结 论 B c l-2 与 B ed in 1 在 老 年 肝 脏 缺 血 再 灌 注 损 伤 的 分 子 机 制 中 可 能 发 挥 着 重 要 作 用 。 【关 键 词 】 老 年 肝 脏; 缺 血 再 灌 注 损 伤 ；细胞因子 调 节 细胞自噬直接参与器官损伤术后缺血再灌注损 修整时，取 3 X 1 X 1 mm3大小的肝组织2〜3 份，置于 伤。长期临床和实验研究发现，老年大鼠肝脏外伤 冷藏的2. 5 % 戊二醛前固定，备电子显微镜检查；切取 后，抗凋亡蛋白Bd -2表达下调，可以激活Bedm 1 诱 肝组织10%甲醛固定，备病理学检查。其中6 例分别 导细胞自噬。但是 Bcl -2及 Bedin 1 在老年大鼠肝外 于术后1、3、7 d 断尾取血1 mL ，测 血 清A L T 和 伤术后不同时期的诱导细胞自噬/细胞凋亡，发挥细 GGT ;分别于术后1、3、7 d 处死2 只，分别于术后3 月 胞保护/细胞损伤作用的调控机制尚不清楚。本研究 和 6 月处死6 只，快速取肝组织2〜3 份，置于冷藏的 建立老年大鼠肝外伤缺血再灌注损伤的模型，通过电 2. 5 % 戊二醛前固定，备电子显微镜检查。取肝组织 子显微镜、免疫印迹和荧光显微镜等方法，观察细胞 10%甲醛固定，备病理学检查。 自噬与细胞凋亡，研究Bcl -2及 Beclin 1 与细胞自噬/ 二、实验方法 细胞凋亡之间的调控关系，探讨在老年肝脏的缺血再 ①