岛津hplc使用.ppt

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岛津hplc使用详解

岛津高效液相的使用 高效液相色谱仪主要包括输液系统,进样系统,色谱柱系统,检测系统和数据处理系统。 运用高效液相色谱仪可以对微量及痕量样品进行定性及定量处理,方法简便高效且实用。 1、输液系统 主要为高压输液泵以及在线脱气装置 (1) 高压输液泵 高压输液泵是液相色谱仪的关键部件,其作用是将流动相以稳定的流速或压力输送到色谱系统。 输液泵的稳定性直接关系到分析结果的重复性和准确性。 (2)在线脱气装置 在线脱气装置用于脱去流动相中的溶解气体,流动相先经过脱气装置再输送到色谱柱。 除在线脱气装置外,目前也采用超声脱气、真空脱气等方式。 脱气不好时有气泡,导致流动相流速不稳定,造成基线飘溢,噪音增加。 2、进样系统 进样器是将试样送入色谱柱的装置。通常采用六通伐进样 3、色谱柱 色谱柱是实现分离的核心部件,要求柱效高、柱容量大和性能稳定。柱性能与柱结构、填料特性、填充质量和使用条件有关。 4、检测器 作用—— 用来连续监测经色谱柱分离后的流出物的组成和含量变化的装置,把色谱洗脱液中组分的量转变成电信号。 目前最常用的检测器主要有:紫外-可见检测器、荧光检测器、电化学检测器、蒸发光散射检测器、质谱检测器 三、液相色谱分离模式 1、吸附色谱(adsorption chromatography) 原理:基于被测组分在固定相表面具有吸附作用,且各组分的吸附能力不同,使组分在固定相中产生保留和实现分离。 固定相: 固定相通常是活性硅胶、氧化铝、活性炭、聚乙烯、聚酰胺等固体吸附剂,所以吸附色谱也称液固吸附色谱。活性硅胶最常用。 流动相: 弱极性有机溶剂或非极性溶剂与极性溶剂的混合物,如正构烷烃(己烷、戊烷、庚烷等)、二氯甲烷/甲醇、乙酸乙酯/乙腈等。 应用: 吸附色谱用于结构异构体分离和族分离仍是最有效的方法,如农药异构体分离、石油中烷、烯、芳烃的分离。 缺点是容易产生不对称峰和拖尾现象。 2、分配色谱 原理: 主要基于样品分子在流动相和固定相间的溶解度不同(分配作用)而实现分离的液相色谱分离模式。 非极性键合固定相: 键合在载体表面的功能分子是烷基、苯基等非极性有机分子。如最常用的ODS(Octa Decyltrichloro Silane)柱或C18柱就是最典型的代表,其极性很小。 极性键合固定相: 键合在载体表面的功能分子是具有二醇基、醚基、氰基、氨基等极性基团的有机分子。 正相HPLC(normal phase HPLC): 是由极性固定相和非极性(或弱极性)流动相所组成的HPLC体系。其代表性的固定相是改性硅胶、氰基柱等,代表性的流动相是正己烷。吸附色谱也属正相HPLC。 反相HPLC(reversed phase HPLC): 由非极性固定相和极性流动相所组成的液相色谱体系,与正相HPLC体系正好相反。其代表性的固定相是十八烷基键合硅胶(ODS柱),代表性的流动相是甲醇和乙腈。是当今液相色谱的最主要分离模式。 ODS(Octa Decyltrichloro Silane) 3、体积排斥色谱 (又称凝胶色谱和分子筛色谱) 原理: 以多孔性物质作固定相,样品分子受固定相孔径大小的影响而达到分离的一种液相色谱分离模式。 4、离子交换色谱 (ion exchange chromatography, IEC) IEC使用表面有离子交换基团的离子交换剂作为固定相。带负电荷的交换基团(如磺酸基和羧酸基)可以用于阳离子的分离,带正电荷的交换基团(如季胺盐)可以用于阴离子的分离。不同离子与交换基的作用力大小不同,在树脂中的保留时间长短不同,从而被相互分离。 高效液相色谱仪的使用方法 仪器名称:高效液相色谱仪 仪器型号:岛津LC-2010AHT 生产厂家:岛津 检测器类型: 软件介绍: 此仪器运行的程序为Class-vp。 Class-vp软件分为几种模式: Offlineprocessing模式 Board configuration模式 Instrument 1 Online模式 1、Offlineprocessing模式: 即为脱机处理模式。当仪器正进行样品采集和方法开发时,可用于开发方法,创建及编辑方法及顺序,以及用样品顺序再处理已经储存的数据,进行采集数据后执行数据分析。 2、board configuration模式: 插板配置和系统管理用于设置系统资源。 3、Instrument 1 Online模式: 用于进入仪器或色谱控制和需要实时数据时,仪器模式用于方法开发和样品处理。 常用工具栏中按钮功能 工具栏按钮:前三个按钮比较常用。用于建立一个新文件、打开和保存文件。 新建:用于建立一个新的方法、顺序、库或自动进样文件。 打开:用于打开一个已有的方法、顺序、报告模板、库或自动进样文件。 保

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