2-1-1微生物的实验室培养.ppt

* * * * 果酒 果醋 腐乳 泡菜 微生物 类型 原理 反应条件 检测方法 酵母菌，真菌，兼性厌氧 醋酸菌，细菌，好氧菌 毛霉，真菌，需氧 乳酸菌，细菌，厌氧菌 无氧呼吸产生酒精 18-25℃ 先通气后密封 重铬酸钾与其反应呈灰绿色 有氧呼吸产生醋酸 30~35℃通入氧气 品尝、pH试纸检测 毛霉产生蛋白酶和脂肪酶 15～18℃接种，酒精含量控制在12％左右 无氧呼吸产生乳酸 常温 无氧条件 pH检测，亚硝酸盐的检测方法 微生物的培养与应用 课题1 微生物的实验室培养 了解有关培养基的用途和种类；知道培 养不同的微生物需要不同的培养基。 了解培养基的基本成分，理解尽管培养 基的配方各不相同，但基本成分相似 掌握无菌技术操作的要求，能区别消毒和灭菌，会运用常用的消毒和灭菌方法。 1.何为培养基？ 3.不同的培养基有不同的配方，但是其基本成分都相同，都包括哪些营养成分？有何作用？请举例说明。 思考: 2.按照不同的培养基划分标准，培养基有哪些种类及其应用？ 一、培养基 一、培养基 人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。 1.定义: 2.分类: 一、培养基 按成分划分 合成培养基 天然培养基 半合成培养基 按形态划分 固体培养基 液体培养基 半固体培养基 按功能划分 选择培养基 鉴别培养基 (1)按培养基的成分 a.合成培养基: 特点: 成分已知、精确、重复性高、但价格较贵、配制麻烦、且微生物在其中生长速度较慢。 一、培养基 b.天然培养基: 蒸熟的马铃薯----用于培育霉菌 普通牛肉汤----用于培育细菌 一、培养基 c.半合成培养基: 一类主要用已知化学成分的试剂配制，同时又添加某种或某些天然成分的培养基 如:马铃薯蔗糖培养基 一、培养基 (2)按照培养基形态划分 a.固体培养基 在液体培养基中加入2%左右的凝固剂(如:琼脂、明胶等）的固体状态的培养基。 用途: 常用于微生物的分离、鉴定计数和菌种保存。 b.液体培养基 不加入凝固剂,成分均匀,微生物可充分接触和利用培养基中的养料,适于生理研究、发酵工业等。 c.半固体培养基 在液体培养基中加入少量(0.2—0.5% )凝固剂而呈半固体状态。 用途: 可用于观察细菌的运动、鉴定菌种和测定噬菌体的效价等方面 固体培养基 半固体培养基 液体培养基 主要用于微生物的分离、计数等 主要用于观察微生物的运动、鉴定菌种等 主要用于工业生产 需加入凝固剂，如琼脂 (3)按照培养基的功能划分 a.选择培养基 b.鉴别培养基 在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其它种类微生物生长的培养基。 根据微生物的代谢特点,在培养基加入某种指示剂或化学药品配制而成，用以鉴别不同种类的微生物。 例：不加氮源的选择培养基可用于分离固氮菌 例：加入伊红和美蓝可用来鉴别饮用水等中是否存在大肠杆菌。如果有大肠杆菌，其代谢产物就与伊红和美蓝结合，使菌落呈深紫色，并带有金属光泽。 培养基，一般都含有水、碳源、氮源和无机盐等营养物质。 另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质，即生长因子(细菌生长必需，而自身不能合成的化合物,如维生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶)以及氧气等的要求。 3、成分 概念 来源 作用 碳源 凡是能为微生物提供所需碳元素的营养物质 无机碳源 CO2 NaHCO3等 有机碳源 糖类 脂肪酸 花生饼 石油等 ①构成细胞物质和一些代谢产物 ②异养微生物的能源 1、微生物的碳源 自养型和异养型微生物分别能利用哪类碳源物质？ 思考 概念 来源 作用 氮源 无机氮源 N2、NH4+、 NO3-、NH3等 有机氮源 尿素、牛肉膏、 蛋白胨、氨基酸 等 凡是能够为微生物提供N元素的营养物质 主要用于合成蛋白质、核酸 及含N的代谢产物 2、微生物的氮源 哪些微生物能够利用分子态氮？氮源能否为微生物提供能量？ 思考 概念 成分 作用 为什么不可缺少？ 常见的生长因子 微生物生长不可缺少的微量有机物 有机物 酶和核酸的组成成分 缺乏合成这些物质所需酶或合成能力有限 维生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶等 3、生长因子 培养基的配制原则 ①目的要明确：根据培养的微生物种类、培养的目的等确定培养基的类型和配制量。 ②营养要协调：培养基中各种营养物质的浓度和比例要适宜。例如：碳氮比4∶1时，谷氨酸棒状杆菌大量繁殖而产生谷氨酸少；碳氮比为3∶1时，菌体繁殖受抑制而谷氨酸合成量大增。 ③pH要适宜：细菌培养基pH中性或偏碱性，霉菌培养基呈酸性。 牛肉膏蛋白胨固体培养基配方 牛肉膏 5.0g 蛋白胨