G实验和GM实验-2012-3-17-张黎RICU.ppt

G test and GM test 北京朝阳医院呼吸与危重症科 张黎 主 要 内 容 一、血清G试验 二、血清GM试验 三、肺泡灌洗液GM试验 一、血清G试验 血清G试验原理 血清G试验的临床价值 血清G试验检测方法 血清G试验假阳性的情况 血清G试验假阴性的情况 血清G试验的优势和局限 1.1 血清G试验原理 G试验检测的是真菌的细胞壁成分---1,3-β-D-葡聚糖（BG），人体的吞噬细胞吞噬真菌后，能持续释放该物质，使血液中含量增高。 定植时BG很少释放入血，因此可有助于鉴别真菌侵袭与定植。 1.2 血清G试验的临床价值 1 ,3-β-D 葡聚糖为真菌细胞壁成分,适用于除隐球菌和接合菌（毛霉菌）外的所有深部真菌感染的早期诊断，尤其是念珠菌和曲霉菌，但不能确定菌种。 诊断侵袭性真菌感染（如侵袭性念珠菌病、侵袭性曲霉菌病、肺孢子菌肺炎等）的方法之一。 1.3 血清G试验检测方法 1.4 血清G试验假阳性的情况 使用纤维素膜进行血透，标本接触过纱布或其他含有葡聚糖的材料； 静脉输注免疫球蛋白、白蛋白、凝血因子或血液制品； 标本中存在脂多糖； 操作者处理标本时存在污染； 使用多糖类抗癌药物； 放化疗造成的粘膜损伤导致食物中的葡聚糖或定植的念珠菌经胃肠道进入血液； 服用多粘菌素,厄他培能,头孢噻肟、吡肟, 磺胺也会不同程度引起假阳性。 1.5 血清G试验假阴性的情况 隐球菌具有厚壁包膜，生长缓慢，导致假阴性； 局灶性曲菌病，BG很少释放入血； 抗真菌药物的使用。 1.6 血清G试验的优势和局限 优势： 鉴别侵袭性感染与定植； 不受机体免疫状态影响，早于临床诊断平均4天；是早期真 菌感染的敏感生物标志。 局限： 不能区分真菌的种类。 二、血清GM试验 血清GM试验原理 血清GM试验的临床价值 血清GM试验检测方法 血清GM试验假阳性的情况 血清GM试验假阴性的情况 血清GM试验的优势和局限 2.1 血清GM试验的原理 GM试验检测的是半乳甘露聚糖（glactomannan，GM），主要适于侵袭性曲霉菌感染的早期诊断； 半乳甘露聚糖是广泛存在于曲霉和青霉细胞壁的一种多糖，菌细胞壁表面菌丝生长时，半乳甘露聚糖从薄弱的菌丝顶端释放，是最早释放的抗原； 检测法是一种微孔板双抗体夹心法，采用小鼠单克隆抗体EBA-2，检测人血清中的曲霉菌半乳甘露聚糖。 2.2 血清GM试验的临床价值 曲菌定植时极少释放入血，因此有助于鉴别侵袭与定植； GM释放量与菌量成正比，可以反映感染程度； 连续检测GM可作为治疗疗效的监测； 在造血干细胞移植患者中的诊断敏感性高； 参考值：I≥0.5为阳性。 2.3 血清GM试验假阳性的情况 使用使用半合成青霉素尤其是哌拉西林/他唑巴坦； 新生儿和儿童（双歧杆菌定植、食用乳制品）； 血液透析； 自身免疫性肝炎等； 食用可能含有GM的牛奶等高蛋白食物。 2.4GM试验假阴性的情况 释放入血循环中的曲霉GM并不持续存在而是会很快清除； 以前使用了抗真菌药物； 病情不严重； 非粒细胞缺乏的患者。 2.5 血清GM试验的优势和局限 优势： 鉴别曲霉菌侵袭性感染与定植； 早于临床症状和影像学异常1周； GM诊断侵袭性曲霉感染的敏感度高于G试验； 血清中存在时间较短，可作为疗效监测。 局限： 不能区分曲霉菌的种类。 G试验和GM试验的联合使用 三、肺泡灌洗液（BAL）的GM试验 血液病患者中IPA诊断价值（回顾性、前瞻性）； 重症COPD患者合并IPA的诊断价值； 综合ICU中重症患者IPA的诊断价值。 Bronchoalveolar lavage fluid galactomannan for the diagnosis of invasive pulmonary aspergillosis in patients with hematologic diseases 回顾性分析99名血液病患者，其中58名确诊或临床诊断IPA者。所有患者的BALF样本均用Platelia（双夹心酶联免疫吸附的方法检测GM水平的试剂盒）检测。　 结果显示，与培养法（50%）和显微镜法（53.3%）相比，BALF的GM检测法敏感性更高[91.3%，光密度（OD）临界值≥1.0]，阳性、阴性预测值分别为76%和96%（OD临界值≥1.0）。 中性粒细胞减少患者和未见减少者的平均OD临界值无差异。 在接受预防性抗真菌治疗的患者中，GM检测法敏感性下降显著。 3.1 文献一：研究结果 Galactomannan testing of bronchoalveolar lavage fluid is useful for diagnosis of invasive pulmona