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miRACLE miRNA 功能研究 产品使用手册 miRACLE miRNA mimics miRACLE miRNA inhibitor Store kit at -20℃ on receipt Version 1.1 (Jun.2014) 1 目录 产品介绍1 产品描述1 需要的其他试剂1 运输保存1 实验步骤2 重悬2 转染2 体内实验4 其他5 相关产品5 技术支持5 产品介绍 产品描述 miRACLE的miRNA mimics 是化学合成的双链RNA分子，主要模拟生物内源的miRNA的表达，进一步增强内源 miRNA的调控作用，降低细胞内靶蛋白的表达。 miRACLE的miRNA inhibitors是通过与内源性的miRNA分子结合，从而特异地靶向抑制miRNA,这种经过化学修 饰的单链RNA分子能有效提高稳定性和活力，从而起到内源miRNA的沉默，提高细胞内靶蛋白的表达。 货号 品名 规格 30xxxx miRACLE miRNA mimics, miRNA code 2.5/5/20nmol 31xxxx miRACLE miRNA inhibitor, miRNA code 2.5/5/20nmol 390000 miRACLE miRNA mimics negative control 2.5/5nmol 390005 miRACLE miRNA inhibitor negative control 2.5/5nmol 390001 miRACLE miRNA mimics FAM-negative control 2.5/5nmol 390006 miRACLE miRNA inhibitor FAM-negative control 2.5/5nmol 390002 miRACLE miRNA mimics Cy3-negative control 2.5/5nmol 390005 miRACLE miRNA inhibitor Cy3-negative control 2.5/5nmol 表一：产品说明 需要的其他试剂  无DNase和RNase的水  微量离心管或微孔板  离心机  无DNase和RNase的枪头  细胞培养板  细胞培养基  转染试剂 运输保存 产品以冻干粉的形式常温运输。收到产品后，请于-20℃～-80℃保存，冻干粉可以稳定保存一年。 1 实验步骤 ！如果有外源的核酸酶存在，RNA oligo容易发生降解。在进行相关试验操作中，请带手套进行操作，尽 量用无DNAase和RNAase污染的试剂，试管，移液枪和枪头。 重悬 步骤一：低速条件下（最大转速4000 ×g ）下离心，保证所有的miRNA 产品粉末都聚集在管底 步骤二：轻轻打开管盖 步骤三：每2.5nmol 的miRNA 产品加入125 μL 的无核酸酶水或灭菌的ddH2O 溶解，配置为终浓度为20 μM 的储备液 步骤四：室温下让溶液管静置几分钟 步骤五：用移液枪轻柔的吹打液体5 次 步骤六：根据用量进行分装，避免反复冻融（建议不超过5 次） 步骤七：放在-20℃或-80℃中小心保存 转染 根据不同的细胞类型和不同的转染试剂转染效率会不同，最合适的细胞类型，转染试剂和转染条件需要通 过实验来进行优化，转染效率的优化对miRNA mimics/inhibitor 的活力有着重要的影响。 为了降低细胞密度、试剂用量，转染效率等因素导致的孔间差异，保证实验的可靠性和可重复性，建议： 1) 转染实验中每个转