糕点中五种添加剂的检测方法研究.doc

糕点中五种添加剂的检测方法研究 　　摘要：建立高效液相色谱法同时测定糕点中的安赛蜜、糖精钠、苯甲酸、山梨酸和脱氢乙酸五种食品添加剂的方法。样品经超声提取，以pH=8.5的0.02 mol/L乙酸铵溶液和甲醇为流动相，采用Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18色谱柱进行分离，用液相二极管阵列检测器于230nm波长处检测。结果表明，五种食品添加剂在0.01 mg/mL-0.12 mg/mL的线性范围内线性良好，相关系数均达0.999以上，加标回收率在92.9%―1017%范围内，相对标准偏差RSD值低于3.2% 关键词：糕点；高效液相色谱；安赛蜜；糖精钠；苯甲酸；山梨酸；脱氢乙酸 中图分类号：TB文献标识码：Adoi：10.19311/j.cnki2016.19.097 食品添加剂是为改善食品色、香、味等品质，以及为防腐和加工工艺的需要而加入食品中的人工合成或者天然物质。在目前所使用的添加剂中，绝大多数为化学合成添加剂，是通过氧化、还原、缩合等一系列化学合成反应所得，有的具有一定的毒性，有的在食品中起变态反应或转变成其它的有毒物质，通过动物实验证明，有些物质有致癌、致畸形等作用 消费者对食品的安全性日益关注，食品添加剂的使用情况越来越受到人们的重视，特别是有机防腐剂（苯甲酸、山梨酸、脱氢乙酸）和人工合成甜味剂（糖精钠、乙酰磺胺酸钾即安赛蜜），由于它们都有一定的毒性，过量摄入会对人体带来伤害甚至引发癌症。在GB2760-2014《食品安全国家标准：食品添加剂使用标准》中，对食品中添加的防腐剂及甜味剂都有明确的限量规定或不得添加 为了防止食品企业超限量或超品种使用添加剂，各级食品监管部门在对食品的监督抽查中都会检测上述5种添加剂。而目前根据我国现有的检测标准，分三种方法（GB/T23495-2009、GB/T23377-2009、GB/T5009.140-2003）来检测，同一样品需进行不同的前处理方法，不但工作效率低，也增加了工作成本，因此五种食品添加剂的同时快速检测成为必要。本文在国家检测标准的基础上加以改进，探讨用高效液相色谱法同时检测糕点中的安赛蜜、糖精钠、苯甲酸、山梨酸、脱氢乙酸的方法，以便能快捷、准确地测定糕点中上述5种添加剂的含量，在实际工作中具有很强的实用性 1材料与方法 1.1仪器与试剂 仪器：Agilent 1260型高效液相色谱仪（安捷伦1260），配二极管阵列检测器G1315D）、超声波清洗器（江苏昆山）、低速离心机（上海安亭） 1.2试剂与材料 甲醇（色谱纯）、乙酸铵（分析纯）、25%氨水、亚铁氰化钾（分析纯）、乙酸锌（分析纯） 标准储备液配制：准确称取安赛蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精钠、脱氢乙酸5个标准品各1.0000g，分别置100mL容量瓶中，加少量水溶解并定容至刻度，配制成1.00mg/mL标准储备液，4℃保存 1.3样品处理 称取经粉碎并搅拌均匀的糕点样品3.00g（精确至0.0001g）至50mL离心管中，加20mL水，摇匀，超声提取10min，加3.0mL 106 g/L的亚铁氰化钾溶液和30mL 220g/L乙酸锌溶液，旋涡混匀，用（1+1）氨水调pH值至7.0左右，用水定容至刻度，加盖振荡，3000r/min离心5min，上清液用0.22μm微孔滤膜过滤1mL至液相进样瓶中，待测 1.4色谱条件 色谱柱Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18（4.6mm×250mm 5-Micron）；柱温25℃，流速1.0mL/min，检测波长225nm，进样量10μL；流动相为A：甲醇、C：pH=8.5的乙酸铵溶液（梯度洗脱见表1） 2.3线性方程和检出限 分别准确移取标准储备液，用水稀释成0.01mg/mL、0.02mg/mL、0.04mg/mL、0.08mg/mL、0.12mg/mL系列混合标准工作液。按实验确定的色谱条件进样，所得标准工作液的色谱图如图1。用峰面积比对质量浓度绘制曲线，所有分析组分在其线性范围期间均有良好的线性关系，结果见表2 组分线性范围mg/mL线性回归方程相关系数安赛蜜0.01-0.12y=33845x-22.0140.9997苯甲酸0.01-0.12y=40240x-24.3680.9999脱氢乙酸0.01-0.12y=46329x-28.9450.9998山梨酸0.01-0.12y=47995x-3.35340.9995糖精钠0.01-0.12y=29706x-22.9370.99982.4回收率及精密度实验 取同一空白糕点样品，分别添加1mg、3mg、5mg的三个浓度的混合标准溶液，其中不同添加量的重复样品数为6。按照本