人教版教学课件生物：31《DNA是主要的遗传物质》课件1(新人教版必修2)(共109张).ppt

 第 一 章 遗传物质的分子结构、性质和功能 2、基因治疗： 基因治疗的临床应用 肿瘤的基因治疗（ 61%病例） 感染性疾病的基因治疗 艾滋病（24%病例） 乙型肝炎 遗传病的基因治疗 心血管疾病的基因治疗 神经系统疾病的基因治疗 tRNA的一级结构特点： 1.含有稀有碱基，如 DHU 甲基化嘌呤 假尿嘧啶 2.含有茎环结构 3′末端为 — CCA-OH 4. tRNA序列中有反密码子 1930’，著名的遗传学家 B.Mcclintock 和HJ.Müller发现：染色体的末端可维持染色体的稳定性 Müller将它定义为“telomere”，这是由希腊语“末端”（telos）及“部分”（meros）组成的 染色体失去了这些片段，就会互相粘连到一块，发生结构及功能上的改变，从而影响到细胞的分裂与生长 1970’，EH.Blackburn 利用四膜虫揭示 了端粒DNA的初步结构： 由非常短且数目精确的串联重复 DNA 片段 组成，富含嘌呤G。 结构：一条链Gn（T/A)m，互补链Cn（A/T)m。 n﹥1，m为1～4。 重复次数由几十到数千不等 不同生物端粒DNA序列 酵母：（TTTGGG）， 200 — 400 bp 尖毛虫：TTTTGGGG ， 20 bp 小鼠： 5 — 80 kb 大鼠： 150 kb 核酶的发现，对中心法则作了重要补充； 核酶的发现是对传统酶学的挑战； 利用核酶的结构设计合成人工核酶 。 热变性 解链曲线：如果在连续加热DNA的过程中以温度对A260（absorbance，A，A260代表溶液在260nm处的吸光率）值作图，所得的曲线称为解链曲线。 生物芯片分类 基因芯片技术是指通过微阵列技术将高密度DNA片段阵列（探针）通过高速机器人或原位合成方式以一定的顺序或排列方式使其附着在如硅胶片等固相表面(﹥400/cm2），用荧光标记的DNA序列或样品与芯片上的探针进行杂交，通过检测每个探针分子杂交信号的强度，获取样品分子的数量和序列信息。 （二）基因芯片的主要类型 四膜虫rRNA的剪接采用自我剪接方式 最简单的核酶二级结构——槌头状结构 (hammerhead structure) 底物部分 通常为60个核苷酸左右 同一分子上包括有催化部份和底物部份 催化部份和底物部份组成锤头结构 除rRNA外，tRNA、mRNA的加工也可采用自我剪接方式。 核酶研究的意义 核 酸 的 变性、复性和杂交 denaturation， renaturation and hybridization of nucleic acid 第 四 节 一、核酸的变性(denaturation) 定义：在某些理化因素作用下，DNA双链解开成两条单链的过程。 方法：过量酸，碱，加热，变性试剂如尿素、 酰胺以及某些有机溶剂如乙醇、丙酮等。 变性后理化性质发生变化： 260nm的紫外吸收值增加 粘度降低，浮力密度升高 二级结构的改变等。 例：变性引起紫外吸收值的改变 DNA的紫外吸收光谱 增色效应：DNA变性时其溶液OD260增高的现象。 Tm：变性是在一个相当窄的温度范围内完成，在这一范围内，紫外光吸收值达到最大值的50%时的温度称为DNA的解链温度，又称融解温度(melting temperature, Tm)。其大小与 DNA分子G+C含量成正比。一般70～85℃. 1. DNA或RNA的定量 OD260=1.0相当于 50μg/ml双链DNA 40μg/ml单链DNA（或RNA） 20μg/ml寡核苷酸 2.判断核酸样品的纯度 DNA纯品: OD260/OD280 = 1.8 RNA纯品: OD260/OD280 = 2.0 OD260的应用 二、核酸的复性(renaturation) 定义: 在适当条件下，变性DNA的两条互补链可恢复天然的双螺旋构象，这一现象称为复性。 减色效应 DNA复性时，其溶液OD260降低。 热变性的DNA经缓慢冷却后即可复性，这一过程称为退火(annealing) 。 复性条件：①有足够的盐浓度。 ②有足够高的温度，比Tm低20～25℃。 在DNA变性后的复性过程中，如果将不同种类的DNA单链分子或RNA分子放在同一溶液中，只要两种单链分子之间存在着一定程度的碱基配对关系，在适宜的条件（温度及离子强度）下，就可以在不同的分子间形成杂化双链(heteroduplex)。 三、核酸的杂交(hybridization)与应用 这种杂化双链可以在不同的DNA与DNA之间形成，也可以在DNA和RNA分子间或者RNA与RNA分子间形