上课用人教版选修 专题一 DNA重组技术的基本工具 共张PPT.ppt

A G T A C A A A T G G C G G T T A T T A T C 1．(2010·苏州模拟)下图为DNA分子在不同酶的作用下所发生的变化，图中依次表示限制性核酸内切酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、解旋酶作用的正确顺序是 (　　) 　　　　　　　　　　　　　　　　　　 A．①②③④ B．①②④③ C．①④②③ D．①④③② C 2.下列有关限制性内切酶识别的叙述，不正确的是 (　) A．从反应类型来看，限制性内切酶催化的是一种水解反应 B．限制性内切酶的活性受温度、pH的影响 C．一种限制性内切酶只能识别双链DNA中某种特定的脱氧核苷酸序列 D．限制性内切酶识别序列越短，则该序列在DNA中出现的几率就越小 　 　 　 　 　 D 3.据右图所示，有关工具酶功能的叙述不正确的是（　 ） A. 限制性内切酶可以切断a处，DNA连接酶可以连接a处 B. DNA聚合酶可以连接a处 C. 解旋酶可以使b处解开 D. 连接C处的酶可以为DNA连接酶 D 1、限制酶和DNA解旋酶的区别？ 2、限制酶和DNA水解酶的区别？ 断开：磷酸二酯键 氢键 都断开磷酸二酯键 产物：DNA片段 单个脱氧核苷酸 3、切取目的基因需切割几次？切口数量？ 2、4 4、如何防止切下的目的基因自身环化？ 不同限制酶切割 基因进入受体细胞的载体 　　 要让一个从甲生物细胞内取出来的基因在乙生物体内进行表达，首先得将这个基因送到乙生物的细胞内去！能将外源基因送入细胞的工具就是载体。 三、基因进入受体细胞的载体 ——“分子 运输车” 1、运载体的作用有哪些？ 作用一：作为运载工具，将外源基因转移到受体细胞中去。 作用二：利用运载体在受体细胞内，对外源基因进行大量复制。 专题1 基因工程 基因与DNA 的关系？ 基因是有遗传效应的DNA片段， 是生物体遗传的功能单位和结构单位。 基因是一段DNA，但是一段DNA不一定是基因。 基因能控制生物的性状。 基因有遗传效应。它可以独立起作用。 类别 项目 ? 复制 ? 转录 场所 特点 模板 原料 酶 能量 碱基 配对 产物 细胞核 只有DNA的一条链 四种核糖核苷酸 RNA聚合酶 ATP A-U C-G T-A G-C 细胞核 DNA的两条链 四种脱氧核苷酸 解旋酶、DNA聚合酶 ATP A-T C-G T-A G-C 两个双链DNA分子 一条单链mRNA 边解旋边复制， 半保留复制 边解旋边转录 通俗的说，就是按照人们的意愿，把一种生物的某种基因提取(复制)出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向地改造生物的遗传特性。 基因工程的概念 又叫基因拼接技术或DNA重组技术 剪切——拼接——导入——表达 1973年转基因微生物——转基因大肠杆菌问世； 1980年第一个动物——转基因小鼠诞生； 1983年第一例转基因植物——转基因烟草出现。 实现了一种生物的某些性状在另一种生物中的表达。 DNA重组技术的基本工具 工欲善其事, 必先利其器. 想一想:获得转基因抗虫棉需要做哪些工作呢? 实现这一精确的操作过程的工具是什么呢? DNA重组技术的基本工具 1.手术刀(基因的剪刀)------准确切割DNA 2.缝合针(基因的针线)-----将DNA片段再连接起来 3.运输工具(基因的运载体)------将体外重组好的 DNA导入受体细胞 一、限制性核酸内切酶——“分子手术刀” 1、来源： 2、作用： 能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。 （1）识别特定核苷酸序列 （2）从特定部位的两个核苷酸之间切开 主要从原核生物中分离纯化 酶具有专一性 限制性核酸内切酶的作用部位 磷酸二酯键 即脱氧核糖、磷酸之间的连接 G P A P A T G G C A T C T T C G A A 一个DNA片段含有几个游离的磷酸基团 2个 大肠杆菌(EcoRI)的一种限制酶能识别GAATTC序列，并在G和A之间切开。 限制酶 限制酶所识别的序列有什么特点？ 限制酶所识别的序列，无论是6个碱基还是4个碱基，都可以找到一条中心轴线，中心轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向对称重复排列的。 识别序列的组成:大多数由六个核苷酸组成 3、结果 黏性末端 平末端 当限制酶在它识别序列的中心轴线两侧将DNA的两条链分别切开时，产生的是黏性末端 当限制酶在它识别序