专题 课题 血红蛋白的提取与分离.ppt

练习巩固 * 课题3 血红蛋白的提取和分离 本课题学习目标 体验从复杂体系中提取生物大分子的基本过程和方法，并了解色谱法、电泳法等分离生物大分子的基本原理。 1、主要概念：①凝胶色谱法 ②电泳法 ③缓冲溶液 ④它们在血红蛋白的提取中分别起到什么作用。 2、主要原理：①凝胶色谱法分离蛋白质的原理 ②电泳法分离样品的原理 ③缓冲溶液的组成和作用机理 3、课题重点：凝胶色谱法的原理和方法 4、课题难点： ①样品的处理 ②色谱柱填料的处理和色谱柱的装填。 知识回顾--------有关蛋白质的几个问题： 1、含量　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 2、组成元素　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 3、相对分子质量 4、基本组成单位： 结构通式： 种类： 5、氨基酸连接方式　 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 占细胞干重的50％以上，细胞中含量最多的有机物 C、H、O、N (大多数含S) 高分子化合物 氨基酸 R H C COOH NH2 脱水缩合 知识回顾--------有关蛋白质的几个问题： 6、肽键结构式：　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 7、形成方式 8、蛋白质多样性的直接原因： (根本原因？)　　　　　　　　　　 9 、蛋白质的鉴定方法　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 氨基酸 肽链 蛋白质 脱水缩合 盘曲折叠 （n条） 细胞和生物体的结构物质，是一切生命活动的主要承担者。 CO NH 氨基酸的种类、数目、排列顺序不同；多肽链的空间结构不同。 10、生理功能 DNA的多样性 根据蛋白质各种特性的差异， 如分子的形状和大小、所带电荷的性质和多少、溶解度和吸附的性质和对其他分子的亲和力等等，可以用来分离不同蛋白质。 问：依据什么来分离和提取蛋白质 基础知识 阅读并回答　　　　　　　　（P64） 1、凝胶色谱法另一个名称； 2、凝胶色谱法分离蛋白质的依据； 3、凝胶的实质； 4、凝胶色谱法的原理。 基础知识　（一） 凝胶色谱法 1、别名： 是根据 ，利用具有网状结构的凝胶的分子筛作用分离蛋白质的有效方法。 3、凝胶 ①性质：一些微小的 ，球内含许多贯穿的通道； ②化学本质： ③实例： （一） 凝胶色谱法 2、依据的特性:　　 分配色谱法 相对分子质量的大小 蛋白质相对分子质量的大小 多孔球体 多糖类化合物 葡聚糖、琼脂糖 当不同的蛋白质通过凝胶时，相对分子质量 的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程较长，移动速度较慢，而相对分子质量 的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在 移动，路程 ，移动速度 ，相对分子质量不同的蛋白质因此得以分离。 较小 较大 凝胶外部 较短 较快 分离出 的蛋白质。 相对分子质量较大 原理： （一） 凝胶色谱法 4.凝胶色谱法分离蛋白质的原理和具体过程 凝胶色谱法分离蛋白质过程的动画演示 1、缓冲物质有哪些？ 2、缓冲溶液的作用是什么？ 3、怎样配制缓冲溶液？ （二）缓冲溶液 1、缓冲溶液概念 在一定的范围内，能对抗外来少量强酸、强碱或稍加稀释不引起溶液PH发生明显变化的作用叫做缓冲作用，具有缓冲作用的溶液叫做缓冲溶液。 　　能够抵制外界的酸或碱的对溶液的PH值的影响，维持PH基本不变。 2、缓冲溶液作用 基础知识　　　　　（二）缓冲溶液 3、缓冲溶液配制 通常由1－2种缓冲剂溶解于水中配制而成。调节缓冲剂的使用比例就可以制得在不同PH范围内使用的缓冲液。 思考：说出人体血液中缓冲液。 NaH2PO4 / Na2HPO4 H2CO3 / NaHCO3 在血红蛋白整个实验室中用的缓冲液是磷酸缓冲液，目的是利用缓冲液模拟细胞内的PH环境，保证血红蛋白的正常结构和功能，便于观察（红色）和材料的科学研究（活性） 1、概念：带电粒子在 的作用下发生迁移的过程。 电场 2、原理：许多重要的