第十三章 分光光度法2016.10基础化学.ppt

例13-1：教材P252  已知某化合物的相对分子质量为251，将此化合物用乙醇作溶剂配成浓度为0.150mmol·L-1的溶液，在480nm波长处用2.00cm吸收池测得透光率为39.8％ ，求该化合物在上述条件下的摩尔吸光系数ε和质量吸光系数a ？ ε= A b·c 解:已知 c＝0.150 ×10-3mol·L-1 b＝2.00cm，T＝0.398 代入公式: = ﹣ lg 0.398 ∕(1.50 ×10-4mol·L-1×2.00cm ) a =ε∕M ε = 1.33 ×103 L · mol -1 ·cm -1 据公式: = 1.33 ×103 ∕251 = 5.30 L· g-1· cm-1 例13-1：教材P252 已知某化合物的相对分子质量为251，将此化合物用乙醇作溶剂配成浓度为0.150mmol·L-1的溶液，在480nm波长处用2.00cm吸收池测得透光率为39.8％ ，求该化合物在上述条件下的摩尔吸光系数ε和质量吸光系数a ？ 小结： 2. Lambert-Beer定律 A = -lgT = -lg It /I0 = ε·b·c E1cm 1 % 三个吸光系数： ε a 1.物质对光的选择吸收 第三节 可见分光光度法 (spectrophotometry) ▲ 原理和特点 原理：根据Lambert-Beer’s law 白光→单色光→有色溶液 →A值→求被测物含量 一、分光光度计( spectrophotometer) 主要部件 1、光源：钨丝灯（λ320~3200nm） 稳定，足够光强度 2、单色器：获取单色光 棱镜或光栅 3、吸收池：比色皿（石英、玻璃） 4、 检测器： 光电管 5、讯号处理及显示器：指针式微安表 图13-4 (b) 混合光在棱镜中的色散 600 600 2、单色器 准直镜 棱镜 出光狭缝 入光狭缝 白光→入光狭缝→准直镜→棱镜或光栅 →色散后的光→准直镜→出光狭缝→ 转动棱镜或光栅 →出光狭缝处获单色光 图13-4 (a) 单色器示意图 2、单色器 4、检测器 ：光电管 两极间加电压，线路中产生电流 光电流大小与照射光强度成正比 光电管工作线路示意图 光 光敏阴极 阴极表面放电子 入射光 放大器 记录器 + - 阳极 阴极(光敏材料如氧化铯) 高电阻 5、指示器 图13-5 吸光度与透光率标尺 2.0 1.0 0.7 0.6 0.5 0.4 0.3 0.2 0.15 0.1 0.05 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 A T(%) -------721型分光光度计采用指针式的微安表- A的刻度不均等 ? 配制一系列标准溶液 显色 分别测定其A值（λmax） 绘制标准曲线 测A待测(条件同上) 从标准曲线上求c待测 A 二、 测定方法 （一）标准曲线法 c · · · · Ax cx 标准曲线图 选择适宜的空白溶液（参比溶液） 用空白（参比）溶液调节透光度为100% ▲ 消除吸收池壁及溶剂对入射光反射 和吸收带来的误差 （二）标准对照法 cx= Ax As · cs 配制标准溶液 cs 测As 同条件下测被测液 Ax 按上式求算 cx 注意： （1）溶液符合朗伯-比尔定律 （2） cs和cx尽量接近 第四节 提高测量灵敏度和准确度 的方法 第五节 紫外分光光度法简介 (自学) 本章要求 分光光度法（分光光度计）： 原理、特点、基本概念 1. 吸收定律及其计算 2. 仪器的主要组成部件及其作用 3. 标准曲线的绘制方法及其应用 A= - lg T = Kbc A=abρ A=εbc E1% 1cm =10 ε Mr ε ε=aM 作 业： P261 第6 ， 10题 第十三章 可见分光光度法和紫外分光光度法 1.光的性质及物质对光的选择性吸收(了解) 2. 分光光度法的基本原理, Lambert-Beer 定律及有关计算(掌握) 3. 分光光度计的基本构造, 熟悉标准曲线法(了解) 4. 提高测量灵敏度和准确度的方法(了解) 5. 紫外分光光光法的一般概念(了解) 本章内容 ▲分光光度法的基本原理及Lambert-Beer 定律 ▲可见分光光光法的测量方法。 -----重点 分光光度法 （spectrophotometry