生化科技学穷微生物学组专题讨论.pdfVIP

生化科技學系微生物學組專題討論 題目 : RTA Promoter Demethylation and Histone Acetylation Regulation of Murine Gammaherpesvirus 68 Reactivation 作者：Zhangsheng Yang, Haidong Tang, Hai Huang, Hongyu Deng 文章來源：PLoS One. 4(2):e4556. Epub 2009 Feb 23. 演講人：Yu-Chun Lee 李宇群 B95B02023 指導老師：Li-Kwan Chang Ph.D.張麗冠 博士 演講日期：November 3rd, 2009 演講地點：The 6th classroom 摘要 Murine gammaherpesvirus 68 (MHV-68)藉由 replication and transcription activator (RTA)控制病毒走向潛伏期(latency phase)或是溶裂期 (lytic phase) 。此篇 研究試圖去探討 DNA的去甲基化 (demethylation)和 histone的乙烯化 (acetylation) 對於 MHV-68的複製有何影響 。首先，將受到 MHV-68感染的 S11E 細胞加入 DNA methyltransferase (DNMT) inhibitor 5-azacytidine (5-AzaC)雖能造成去甲基 化現象但只能些微的活化 RTA promoter ，相反地，加入histone deacetylase (HDAC) inhibitor trichostatin A (TSA)卻能強烈地使 病毒由潛伏期進入溶裂期。隨後也發現 HDAC3會在潛伏期時被聚集在 RTA promoter 上並抑制 RTA promoter的轉錄 (transcription) ，而TSA則可以將 HDAC3從 RTA promoter 上移除使病毒得以再 活化 。另外， in vivo的情況下分別在 老鼠肺部看見 RTA promoter在溶裂期時以 低甲基化(hypomethylated)的狀態存在 ，在脾臟看見在潛伏期的時候甲基化的程 度有上升的現象。總結以上 ，作者發現 MHV-68在 S11E細胞由潛伏期重新被活 化具有重大影響的是 histone acetylation ，而非DNA methylation 。 前言  本研究之重要性 Murine gammaherpesvirus 68 (MHV-68) 和同屬 gammaherpesvirus 家族的 human gammaherpesvirus ：Epstein-Barr Virus (EBV)和 Kaposi’s sarcoma-associated herpesvirus (KSHV)這兩種與造成人類淋巴病變和許多癌症 有關[1,2,3,4的病毒] 在病理上有很大的關聯性。在 in vitro的情況下 EBV和 KSHV的培養具有困難性，再加上 EBV和 KSHV也缺乏良好的 in vivo 系統讓 人們可以直接的觀察研究，相形之下具有良好in vitro和 in vivo模型的 MHV-68[3,5,6,7就成了研究] EBV和 KSHV的橋梁 ，因此了解MHV-68是如何 被 RTA調節由潛伏期進入溶裂期將可以進而幫助理解 EBV和 KSHV造成疾病 的成因。 前人作過的研究 在先前的研究中已經知道 RTA廣泛的存在 gammaherpesvirus中 [8,9,10,11] ， 對於KSHV 、MHV-68的再活化扮演 ”分子開關”這個重要且必需的角色 [9,12,13,14] ，也有研究指出利用5-AzaC可以使在細胞株的 KSHV從潛伏期再 活化[15] ，除此之外，HDAC inhibitor可以強烈的活化 RTA promoter ，而且 HDACs會被聚集到 RTA的 promoter 上[16] ，在EBV的研究中也發現 chromatin 的修飾調節著病毒的再活化