生态学实验3.pdfVIP

专业：应用生物科学 姓名：雷鹏 学号：3120100376 日期： 2015.04.29 地点： 生物实验中心213 课程名称： 生态学及实验（甲） 指导老师： 成绩： 实验名称： 群落物种多样性测定和计算 实验类型： 同组学生姓名： ⼀、实验⺫的 意义：⽓孔控制着地球⽣物圈的CO 和⽔分交换，从⽽控制着⽣态系统最重要的初级⽣ 2 产和全球⽓候变化过程。气孔免疫——气孔对微生物的感应性关闭是生命科学前沿研究 领域之一，其对植物抗病免疫，新型生物节水技术具有重要的科学意义和应用前景。有 关研究对理解⽣物与环境、⽣物与⽣物之间的相互作⽤的分⼦和⽣理⽣态机制具有重要 科学意义，同时对提⾼农林植物⽔分利⽤效率具有重要⽣产实践意义。 目的： （1）掌握从蚕⾖叶⽚撕取下表⽪⽤于研究⽓孔运动的技术 （2）掌握⽓孔开度的基本测量⽅法，对⽓孔调控的剂量反应和时间动态规律有初步的 了解 ⼆、实验原理 图⽰：⽓孔感应微⽣物关闭及致病微⽣物骗开⽓孔的过程。 1 三、实验材料、仪器与试剂 实验材料：新鲜的蚕⾖叶⽚ 实验⽤品：显微镜、镊⼦、单⾯⼑⽚、培养⽫、载玻⽚、盖玻⽚、吸⽔纸、⺫镜测微尺 实验试剂：MES/KCl缓冲液，溶液A ，溶液B 四、操作步骤 在三个培养⽫中各加⼊9 mL的MES/KCl缓冲液 撕取蚕⾖叶⽚下表⽪放⼊培养⽫中（5个表⽪条/培养⽫），光照培养1 h 随后分别在三个培养⽫中各加⼊1 mL的MES/KCl缓冲液、A溶液和B溶液，继续光照培 养1 h （每5分钟搅动⼀次培养溶液） 制⽚、⽓孔开度测量 （每组3⼈，每⼈各测⼀个处理 ⽓孔开度测量： 在10×10倍视野聚焦，然后切换⾄10×40倍视野, 校正⺫镜测微尺1⼩格所代表的⻓度 在10×10倍视野聚焦，然后切换⾄10×40倍视野，测量⽓孔开度 五、实验结果 实验数据⻅最后 图 1 不同处理⽅式下⽓孔开度平均值 2.1 平均值 1.975 格 / 度 开 1.85 孔 ⽓ 1.725 1.6 A B 对照 不同处理⽅式 实验结果显⽰A处理⽓孔开度对照组⽓孔开度B处理⽓孔开度。可以看出B溶液的菌液 浓度要⾼于A溶液的菌液浓度。对于A组⽓孔开度⼤于对照，可能是由于测量的时候出现 了⼀定的误差。 2 六、问题与思考 1 、由于细菌并不能够像真菌⼀样通过攻击叶⽚表⾯来进⼊植物体内，因此⽓孔和损伤 位点来进⼊细胞。所以⽓孔⼀直被认为是致病性细菌⼊侵植物内部的被动通道。细菌可 以通过鞭⽑运动向打开的⽓孔周围靠近，进⽽侵⼊植物内部。 2 、⽓孔本省也可以作为⼀道主动防御病原细菌⼊侵的屏障。在拟南芥中，⼤肠杆菌 ⾬丁⾹假单胞菌都会引发表⽪条上⽓孔的快速关闭。这能够⼤⼤降低病菌透过⽓孔⼊侵 宿主植物的概率。 3 、许多致病性的细菌进化出能够使得⽓孔重新打开的机制。如丁⾹假单胞菌番茄治 病变种DC3000能够分泌冠毒素COR蛋⽩来诱导⽓孔重新打开。 表 1 不同处理下⽓孔开度测定 A