人羟脯氨酸(Hyp)ELISA试剂盒说明书.pdf

取上清。 5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存 于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。 本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断 自备物品 人 （Human）羟脯氨酸 （Hyp）ELISA检测试剂盒 1. 酶标仪 （450nm） 2. 高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL 使用说明书 3. 37℃恒温箱 检测原理 操作注意事项 试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验 （ELISA）。往 1. 试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的 预先包被羟脯氨酸 （Hyp）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准 浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解 品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色， 后再使用。 TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终 2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封 （低温干燥）保 的黄色。颜色的深浅和样品中的羟脯氨酸 （Hyp）呈正相关。用酶标 存。 仪在450nm 波长下测定吸光度 （OD 值），计算样品浓度。 3. 浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明 样品收集、处理及保存方法 书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。 1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细 4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。 胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心 5. 所有液体组分使用前充分摇匀。 地分离。 2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。 3. 细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。 4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟 上海笃玛生物科技有限公司 试剂盒组成 2. 设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μ 名称 96孔配置 48孔配置 备注 L； 微孔酶标板 12孔×8条 12孔×4条 无 标准品 0.3mL*6管 0.3mL*6管 无 3. 样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；空白孔不 样本稀释液 6mL 3mL 无 加。 检测抗体-HRP 10mL 5mL 无 4. 除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶 20×洗涤缓冲液 25mL 15mL 按说明书进行稀释 底物A