大鼠(Rat)Ⅲ型胶原(ColⅢ).pdf

本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断 3. 细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。 本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断 本本试试剂剂盒盒只只能能用用于于科科学学研研究究，，不不得得用用于于医医学学诊诊断断 大鼠（Rat）Ⅲ型胶原（ColⅢ）ELISA检测试剂盒 4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟 大鼠（Rat）Ⅲ型胶原（ColⅢ）ELISA检测试剂盒 大大鼠鼠（（RRaatt））ⅢⅢ型型胶胶原原（（CCoollⅢⅢ））EELLIISSAA检检测测试试剂剂盒盒 使用说明书 取上清。 检测原理 检测原理 检检测测原原理理 5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于 试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预 -20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。 自备物品 自备物品 先包被Ⅲ型胶原（ColⅢ）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准 自自备备物物品品 品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色， 1. 酶标仪（450nm） TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终 2. 高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL 的黄色。颜色的深浅和样品中的Ⅲ型胶原（ColⅢ）呈正相关。用酶 3. 37℃恒温箱 操作注意事项 操作注意事项 标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。 操操作作注注意意事事项项 样品收集、处理及保存方法 样品收集、处理及保存方法 样样品品收收集集、、处处理理及及保保存存方方法法 1. 试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的 1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞 浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解 刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地 后再使用。 分离。 2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。 2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。 3. 浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明 书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。 1. 手工洗板：甩尽孔内液体，每孔加满洗涤液，静置1min后甩尽 4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。 孔内液体，在吸水纸上拍干，如此洗板5次。 5. 所有液体组分使用前充分摇匀。 2. 自动洗板机：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。 试剂盒组成 操作步骤 试剂盒组成 操作步骤 试试剂剂盒盒组组成成 操操作作步步骤骤 名称 96孔配置 48孔配置 备注 1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封 名称 96孔配置 48孔配置 备注 名名称称 9966孔孔配配置置 4488孔孔配配置置 备备注注 微孔酶标板 12孔×8条 12孔×4条 无 袋