植物(Plant)过氧化氢(H2O2)ELISA试剂盒说明书.pdf

于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。 自备物品 1. 酶标仪 （450nm） 本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断 2. 高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL 植物 （Plant）过氧化氢 （H2O2）ELISA检测试剂盒 3. 37℃恒温箱 操作注意事项 使用说明书 1. 试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的 检测原理 浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解 试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验 （ELISA）。往 后再使用。 预先包被过氧化氢 （H2O2）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标 2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封 （低温干燥）保 准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色， 存。 TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终 3. 浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明 的黄色。颜色的深浅和样品中的过氧化氢 （H2O2）呈正相关。用酶 书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。 标仪在450nm 波长下测定吸光度 （OD 值），计算样品浓度。 4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。 样品收集、处理及保存方法 5. 所有液体组分使用前充分摇匀。 1. 样本不能含叠氮钠 （NaN3），因为叠氮钠 （NaN3）是辣根过氧化 物酶 （HRP）的抑制剂。 2. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行。 3. 植物萃取液或其它相关样本：请1000 x g离心20分钟，取上清 即可检测。 4. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存 试剂盒组成 2. 设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μ 名称 96孔配置 48孔配置 备注 L； 微孔酶标板 12孔×8条 12孔×4条 无 标准品 0.3mL*6管 0.3mL*6管 无 3. 样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；空白孔不 样本稀释液 6mL 3mL 无 加。 检测抗体-HRP 10mL 5mL 无 4. 除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶 20×洗涤缓冲液 25mL 15mL 按说明书进行稀释 底物A 6mL 3mL 无 （HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅 底物B 6mL 3mL 无 或恒温箱温育60min。 终止液