人(Human)C-反应蛋白(CRP)-NEWA.pdf

本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断 取上清 5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存 人 （Human）C-反应蛋白（CRP）ELISA检测试剂盒 于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻 使用说明书 自备物品 检测原理 1. 酶标仪（450nm） 试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往 2. 高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL 预先包被C-反应蛋白 （CRP）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标 3. 37℃恒温箱 准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤 用底物TMB显色， 操作注意事项 TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终 1. 试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的 的黄色 颜色的深浅和样品中的C-反应蛋白 （CRP）呈正相关 用酶 浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解 标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度 后再使用 样品收集、处理及保存方法 2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保 1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细 存 胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心 3. 浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明 地分离 书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度 2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝 3000转离心30分钟取上清 4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作 3. 细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物 5. 所有液体组分使用前充分摇匀 4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎 3000转离心10分钟 试剂盒组成 名称 96孔配置 48孔配置 备注 封袋密封放回4℃ 微孔酶标板 12孔×8条 12孔×4条 无 标准品 0.3mL*6管 0.3mL*6管 无 2. 设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μ 样本稀释液 6mL 3mL 无 L； 检测抗体-HRP 10mL 5mL 无 3. 样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；空白孔不 20×洗涤缓冲液 25mL 15mL 按说明书进行稀释 底物A 6mL 3mL 无