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高中生物人教版选修三专题二2.2.1《动物细胞培养和核移植技术》课件 (共27张PPT)
2.2.1动物细胞培养和核移植技术 1.掌握动物细胞培养的过程与条件。 2.了解动物细胞培养的过程的应用。 3.掌握动物体细胞核移植技术的过程。 4.了解动物体细胞核移植技术应用前景 1.动物细胞培养的取材.生长特点.过程.条件 2.传代培养与原代培养;细胞株与细胞系的比较 3.动物细胞培养与植物组织培养的比较 4.细胞核移植的过程与用到的技术 【问题分析一】 动物细胞培养的过程 1.动物细胞培养应该选择什么样的材料?原因?原理? 细胞增殖 2.动物细胞培养能否像植物组织培养那样最终培养成新个体? 不能,动物细胞培养只能使细胞数目增多,不能发育成新的动物个体 【问题分析一】动物细胞培养的过程 动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织 原因:分裂能力比较强。 3.培养前用什么酶处理使细胞分散成单个细胞?这样做的目的? 使细胞与培养液充分接触。 用培养液将分散的细胞稀释制成 再培养。 细胞悬液 4.动物细胞培养过程中细胞生长特性: 悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上,称为细胞贴壁。 培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴附。 当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞就会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的接触抑制。 动物细胞培养存在细胞的接触抑制的特性, 那么细胞在培养瓶壁上可形成几层细胞? 一层 6.目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为多少代以内?原因是? 5.原代培养和传代培养的区别?50代后为什么能无限增殖? 原代培养一般传至10代左右。 传代培养细胞一般传至 代以后就不易传下去了,少部分细胞会突变能传至无数代,遗传物质发生改变。 10 传至10代以内 遗传物质不改变,保持正常二倍体核型。 细胞悬浮液 10代细胞 50代细胞 无限传代 原代培养 传代培养 细胞株 细胞系 如何界定原代培养和传代培养;细胞株和细胞系? 细胞贴壁 细胞的接触抑制,细胞就会停止分裂增殖 遗传物质改变 总结:动物细胞培养过程 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 细胞悬液 剪碎 用胰蛋白酶处理 10代细胞 转入培养瓶 40-50代细胞 传代培养 无限传代 单个细胞 加培养液稀释 传代10代以内,遗传物质不改变,保持正常二倍体核型。 传代10-50代左右,增长缓慢以至于完全停止,部分细胞核型可能发生变化(遗传物质可能改变) 为什么用胰蛋白酶处理? 原代培养特点:细胞贴壁、细胞的接触抑制 继续传代培养少部分细胞获得不死性,细胞突变,遗传物质已经改变,等同于癌细胞。 原代培养 细胞株 细胞系 1.动物细胞培养需要什么样的条件? 无菌、无毒的环境、营养、温度和PH、气体环境 2.如何保证培养过程中的无菌、无毒环境? ⑴ 和所有 进行无菌处理。 ⑵培养液中加 ⑶定期更换培养液 3.动物细胞培养液的主要成分是什么?动物细胞培养基与植物组织培养基相比较有何独特之处? 【问题分析一】动物细胞培养的条件 培养液 培养用具 糖、氨基酸、无机盐、微量元素、促生长因子 (维生素、激素等)和动物血清 独特之处有:1.液体培养基 2.成分中有动物血清等 抗生素 4.动物细胞培养基属于什么培养基?什么是合成培养基?为什么要加入动物血清? 合成培养基 将细胞所需的营养物质按其种类和数量严格配制而成的培养基。 血清可以补充合成培养基 中缺乏的物质。 5.哺乳动物适宜温度?多数细胞生存适宜PH? 细胞培养所需气体主要?O2和CO2 的作用分别是?细胞培养O2、CO2 通常为? 36.5±0.5℃ 7.2-7.4 95%空气和5%的CO2 O2:是细胞代谢所必需的。CO2 :维持培养液的的PH 动物细胞培养中能否把胰蛋白酶处理换成胃蛋白酶? 细胞的全能性 细胞株、细胞系 植物体 培养结果 获得细胞或细胞产物 快速繁殖、培育无病毒植株等 培养目的 葡萄糖、 动物血清 蔗糖、 植物激素 培养基特 有成分 液体培养基 固体培养基 培养基性质 细胞增殖 原理 动物细胞培养 植物组织培养 比较项目 [问题分析二]植物细胞和动物细胞培养的比较 培养过程 有分化, 无突变 无分化, 可能有突变 电激处理使供体核进入受体卵母细胞构建重组胚胎 卵母细胞采集、培养 MⅡ期卵母细胞 供体牛 供体细胞注入去核卵母细胞 代孕母牛 克隆牛 体细胞培养 去核卵母细胞 去核 胚胎 移植 【问题分析三】动物核移植技术的过程: 供体细胞(供核) 细胞培养 体细胞 卵巢卵母细胞 (MⅡ中期:供质) 去核 无核卵母细胞 显微操作注入 细胞融合 重组 细胞 构建重 组胚胎 胚胎移植 代孕 母体 生出
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