化学成分研究方法.pptVIP

2.2.2中药有效成分的分离与精制 本节介绍中药化学成分的一般分离方法，有萃取、沉淀、结晶、色谱等方法。重点掌握中草药有效成分分离方法的原理及规律。 物质分离的许多操作往往在溶液中进行。实践中可以采用下列方法： （一）根据物质溶解度差别进行分离 1.结晶及重结晶法 利用不同温度可引起物质溶解度改变的性质来分离物质。 关于结晶和重结晶概念：结晶是指由非结晶状态到形成结晶的操作过程。重结晶指由纯度低结晶处理成纯度高结晶的操作过程。二者从操作角度差别是起始物不同。 （一）根据物质溶解度差别进行分离 判断结晶纯度的方法。 （1）晶型均一，色泽均匀。 （2）有一定的熔点和较小的熔距，熔距应在2度以内。 （3）TLC或PC分别用三种以上溶剂系统检识，同单一圆整斑点。 （4）HPLC或GC检查呈现单峰。 （一）根据物质溶解度差别进行分离 结晶和重结晶操作： 提取或分离物 ↓溶于选择的溶剂，加热成饱和溶液，过滤 溶液 ↓放置（冷藏）析晶，过滤 粗结晶 ↓重复上述操作（重结晶） 结晶 （一）根据物质溶解度差别进行分离 选择结晶溶剂的原则是： 对要结晶的成分热时溶解度大，冷时溶解度小，对杂质冷热都不溶或冷热都易溶； 另外要求结晶溶剂不与待结晶物质发生化学反应； 沸点较低、易挥发； 无毒或毒性很小。 选择溶剂依据“相似相溶”原理。 （一）根据物质溶解度差别进行分离 2.沉淀法 （溶剂沉淀法） 在溶液中加入另一种溶剂以改变混合的极性，使一部分物质沉淀析出。从而实现分离。如：水提醇沉法（除去多糖或蛋白质）；醇提水沉法（除去树脂或叶绿素）；醇提乙醚沉淀或丙酮沉淀法（使皂苷沉淀析出）  （一）根据物质溶解度差别进行分离 水提醇沉法系指处方中药材加水煎煮，既提取出有效成分，如：生物碱盐、甙类、有机酸类、氨基酸、多糖类等；同时也提出一些水溶性杂质，如：淀粉、蛋白质、粘液质、鞣质、色素、无机盐等。若往水煎液中加入适量乙醇，可以改变其溶解性能而将杂质部分或全部除去。当乙醇浓度达到60%～70%时，除鞣质、树脂等外，其他杂质已基本上沉淀而除去。如果分2～3次加入乙醇，浓度又逐步提高，最终达到75%～80%，则除去杂质的效果更好。  （一）根据物质溶解度差别进行分离 醇提水沉法系指将中药原料用一定浓度的乙醇用渗漉法、回流法提取，即可提取出生物碱及其盐、甙类、挥发油及有机酸类等；虽然多糖类、蛋白质、淀粉等无效成分不易溶出，但树脂、油脂、色素等杂质却仍可提出。为此，醇提取液经回收乙醇后，再加水处理，并冷藏一定时间，可使杂质沉淀而除去。40%～50%的乙醇可提取强心甙、鞣质、蒽醌及其甙、苦味质等；60%～70%乙醇可提取甙类；更高浓度乙醇则可用于生物碱、挥发油、树脂和叶绿素的提取。 （一）根据物质溶解度差别进行分离 3.pH法：对酸性、碱性或两性有机化合物来说，常可通过加入酸、碱以调节溶液的pH值，改变分子的存在状态（游离型或解离型），从而改变溶解度而实现分离。酸提碱沉法（使生物碱类成分沉淀）。碱提酸沉法（使黄酮、蒽醌等沉淀）；等电点法（使蛋白质沉淀） （一）根据物质溶解度差别进行分离 4.金属盐沉淀法：酸性或碱性化合物还可通过加入某种沉淀试剂使之生成水不溶性的盐类等沉淀析出。 （一）根据物质溶解度差别进行分离 铅盐沉淀法：利用中性醋酸铅或碱式醋酸铅在水或稀醇溶液中能与许多物质生成难溶的铅盐或络盐沉淀而分离的方法。中性醋酸铅可沉淀具有邻二酚羟基和羧基的成分；碱式醋酸铅的沉淀范围较广，可沉淀含酚羟基和羧基及中性皂苷等。如沉淀为杂质，则可弃去；如沉淀为所要成分，则可将沉淀悬浮于水或稀醇中，通H2S气体或加入稀H2SO4、Na2SO4等脱铅，成分即可分离。 （一）根据物质溶解度差别进行分离 专属试剂沉淀法: 某些试剂能选择性地沉淀某类成分，称为专属试剂沉淀法。如雷氏铵盐能与水溶性生物碱类生成沉淀，可用于分离水溶性生物碱与其它生物碱；胆甾醇能和甾体皂苷沉淀，可使其与三萜皂苷分离；明胶能沉淀鞣质，可用于分离或除去鞣质等。 （二)根据物质在两相溶剂中的分配比不同进行分离 常见的方法有: 简单的液．液萃取法、 逆流分溶法 (CCD)、 液滴逆流色谱法(DCCC)、 高速逆流色谱(HSCCC). （二)根据物质在两相溶剂中的分配比不同进行分离 1．液一液萃取与分配系数K值 将两种相互不能任意混溶的溶剂(例如氯仿与水)置分液漏斗中充分振摇，放置后即可分成两相。此时如果其中含有溶质，则溶质在两相溶剂中的分配比(K)在一定