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实验二 染毒方法介绍 一、实验目的及要求: 掌握和了解实验动物的四种常用染毒方法。 二、实验主要内容与方法: 1、急性经口染毒 2、急性经皮肤染毒 3、急性经呼吸道染毒 静式呼吸道吸入染毒 动式呼吸道吸入染毒 4、注射给药 三、实验材料 小鼠、鼠笼、灌胃针、蒸馏水、脱毛剂(硫化钠8克溶于100毫升水中)、纱布、油纸、胶布、 4、5号针头注射器、小鼠固定器 1、经口染毒 1)灌胃法:用左手抑持小鼠使其头部充分伸直,但不宜抓得太紧,右手持灌胃器,自口角插入口腔,沿上腭壁轻轻进入食道(当灌胃针进入约3cm左右时即达胃内 )注入药液。 ** 灌胃法。 一般一次灌胃体积: 小鼠:0.1~0.3ml/10g;大鼠为0.5~1.5ml/100g。 一次最大灌胃量: 小鼠为1毫升;大鼠为2~3毫升。 2)自由摄食法: 小鼠或大鼠自由摄食与饮水,将毒物拌入饲料或溶于水中通过自由饮食而染毒。 2、呼吸道染毒 吸入染毒和气管内注入染毒 吸入染毒: 1)静式吸入染毒 将一定数量的动物放在密闭的染毒柜中,加入易挥发的受拭物,染毒时间一般为2小时~4小时。要求受试物在10分钟内蒸发完毕。 简易,但随实验进行,氧分压、受试物浓度逐渐减低。 2)动式吸入染毒 动式吸入染毒设备由染毒柜、机械通风系统和配气系统三部分构成。氧分压、受试物浓度稳定,但受试物消耗量大,易污染环境 3. 经皮肤染毒 1)?被毛的去除 A、 机械法:剪/剃去某部位的被毛 B、化学法:涂抹脱毛剂(硫化钠8克溶于100毫升水中),3~5min后用温水洗去脱毛剂与毛。 2)? 染毒 A、脱毛后24小时定量涂抹1毫升受试物(不同剂量组需要配不同浓度的受试物,如有机磷农药),用无刺激的胶布固定,接触一定时间。 B、接触规定的时间后去除受试物,用温水洗净皮肤上的残存物,观察中毒现象及两周内死亡情况。若重复给药,则间隔1星期再度脱毛,给药。 4、注射给药染毒 1)? 皮下注射(最好二人合作) 一人左手抓住鼠的头部,右手抓住鼠尾, 另一人左手拇指、食指提起皮肤,右手持注射器(5号或6号针头)将针头刺入(背部、腹部、大腿内外侧)。 小鼠的药量一般不超过0.05~0.25ml/10g。 2) 肌肉注射 部位:肌肉发达的如大腿部。 注射时迅速刺入肌肉内,回抽针栓若无回血,即可进行注射。为什么? 3) 静脉注射 小鼠和大鼠:将鼠固定在小鼠或大鼠固定器中,露出尾巴,用酒精涂察尾部,或用50度热水浸泡半分钟,使血管扩张。用左手拉住尾尖,选择扩张明显的血管,右手持注射器(选用4号针头),将针头刺入尾静脉,推入药液。 4) 腹腔注射 小鼠、大鼠:以左手抓住动物,使腹部向上,右手将注射针头从左(右)下腹部刺入皮下,并以45度角穿过腹肌,固定针头,缓慢注入药液。0.1-0.2ml/(10克体重) * * 经口染毒最常见的就是灌胃法,用左手抑持小鼠使其头部充分伸直,但不宜抓得太紧,右手持灌胃器,自口角插入口腔,再从舌背面紧沿腭部进入食管,注入药液。若感到阻力或动物挣扎,停止进针,拔出,重新来过,以免刺破食管或入气管。若只是一次染毒,灌胃前禁食,小鼠4小时,大鼠24小时。若多次染毒,一般不禁食,但定时灌胃。 重点练习灌胃法。一般一次灌胃体积小鼠:0.1~0.3ml/10g,大鼠为0.5~1.5ml/10g。一次小鼠最大量为1毫升。大鼠灌胃量为2~3毫升。 先保定动物,即用右手将小鼠尾巴提起,置于鼠笼或粗糙的平面上,当小鼠向前挣扎时,用左手的拇指和食指捏住小鼠两耳后颈背皮肤,翻转小鼠置于掌心,拉直后肢,以小指压住小鼠尾巴即可。在保定小鼠过程中,不要用力过大,勿握其颈部,以免窒息死亡。以灌胃器轻轻压其头部,使口腔与食道成一条直线,再将灌胃针沿上腭壁轻轻进入食道,当灌胃针进入约3cm左右时即达胃内。如果灌胃针的位置插入正确,小鼠可自行吞服药,灌胃针插入位置不正确,小鼠会强烈挣扎,必须拔出重插,否则可能将药物灌入气管,造成小鼠死亡。注完药液后轻轻抽出灌胃针。小鼠一次最大灌胃量为:0.4ml/10g.w。
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