中药新药研究思路.ppt

结果分析 关于水提与醇提 I．全方醇提液优于全方水提液； Ⅱ．醇提液是有效的； Ⅲ．醇提后的药渣再水煎，水煎液无效。 在不考虑白芷挥发油的前提下，以醇提为优，药渣不必再水煎 关于合提与分提 I．合提效果优于单味药分别提取， Ⅱ．全方混合提取与单味药分别提取后再混合无显著性差异 为简化工艺，适于大生产，应选择全方合提的工艺。 关于白芷挥发油 Ⅰ．本处方剂量白芷挥发油无效；Ⅱ．白芷提油前后，其醇提液药理作用变化不大； Ⅲ．白芷提取挥发油后药渣再与延胡索合用醇提取，此提取液与提取液再加入挥发油两者药理作用无显著性差异。 挥发油对本处方贡献不大 确定工艺路线为： 全方 乙醇回流 提取液 回收乙醇 浓缩液 除杂 药液 喷 雾干 燥 喷干粉 制粒 压片 分散片 3、工艺条件的确定 （1）提取工艺条件筛选 提取方法比较 方法 延胡索乙素含量（mg/g） 欧前胡素含量(mg/g) 干膏收率（%） 回流 0.39 0.66 14.31 渗漉 0.37 0.63 12.84 回流提取欧前胡素、延胡索乙素含量均高于渗漉提取，干膏收率二者差别不大，故选择提取方法为回流提取。 评价指标 转移率 回流提取条件筛选 A 白芷药材粉碎度考察 方中延胡索质坚硬，溶媒不易渗透，必须打成粗粉投料。 而白芷既可以饮片投料，也可以粗粉投料，因此，考察了白芷饮片与粗粉投料的区别，以欧前胡素含量、干膏收率为指标进行评价。 粉碎度 欧前胡素含量 (mg/g) 干膏收率（%） 饮片 0.62 14.16 粗粉 0.63 17.23 白芷药材粉碎度考察 结果表明饮片与粗粉提出欧前胡素量差别不大，但粗粉出膏率大，提取杂质也多，导致服用量增加，故选择饮片投料为佳。 B 浸泡时间考察 因全方采用醇提的工艺，乙醇不易渗入药材内部，尤其是延胡索质坚硬而致密，溶媒更加不易穿透，影响提取效率，因此有必要进行浸泡时间的考察。 以全部药材透心时间计，浸泡时间为2小时。 C 醇提条件考察 在影响醇提的因素中，醇浓度、醇用量，提取次数、时间为重要的4 个因素。 醇浓度须单独筛选； 乙醇用量、提取次数、提取时间可采用L9(34)正交表进行试验。 水 平 因 素 乙醇浓度（%） 1 60 2 70 3 80 乙醇浓度的选择 70%乙醇提取效果最好。 思考：若80%的效果最好呢？ 白芷、元胡醇提工艺正交实验因素水平表 水 平 因 素 空白 A 加醇量（倍） B 提取时间（h） C 提取次数（次） D 1 3 0.5 1 2 5 1.0 2 3 7 1.5 3 以延胡索乙素、欧前胡素含量、干膏收率为评价指标，权重系数分别取0.5、0.3、0.2进行综合评价。 实验号 列 号 评价指标 综合评分 A B C D 延胡索乙素含量（%） 欧前胡素含量（%） 干膏收率（%） 1 1 1 1 1 ? ? ? ? 2 1 2 2 2 ? ? ? ? 3 1 3 3 3 ? ? ? ? 4 2 1 3 2 ? ? ? ? 5 2 2 1 3 ? ? ? ? 6 2 3 2 1 ? ? ? ? 7 3 1 2 3 ? ? ? ? 8 3 2 3 1 ? ? ? ? 9 3 3 1 2 ? ? ? ? 白芷、元胡醇提正交实验表 经方差分析，提取次数具有显著性差异。但结合直观分析可知，提取第二、三次与第一次差异显著，但第二、三次之间无显著性差异，因此选取提取次数为两次。 得醇提工艺路线为：延胡索（醋制）粗粉、白芷饮片加5倍量70%乙醇加热回流提取2次，每次1小时。 提取 验证实验 按处方称取药材三份，每份200g，用筛选出的醇提工艺条件(70%乙醇，5倍量，提取2次，每次1h)进行提取，测定延胡索乙素、欧前胡素含量及干膏收率，并同时测定药材延胡索乙素、欧前胡素含量。 结果显示，测定含量与正交结果一致，有效成分提取率达90％以上。表明此醇提工艺条件较稳定、可行。 （2）除杂工艺条件筛选 方 法 评 价 指 标 澄清剂 延胡索乙素含量（%） 欧前胡素含量（%） 干膏收率（%） 高速离心 大孔树脂 350目滤布过滤 除杂方法的选择 成本 提出液趁热用350目滤布过滤，杂质较少，固形物含量低于13.0%，因此不再用其它除杂方法。 除杂 （3）浓缩与干燥工艺条件筛选 浓缩条件 延胡索乙素（%） 欧前胡素（%） 常压 0.026 0.047 减压 0.036 0.066 浓缩前 0.045 0.07