临床微生物.ppt

* 美国全国医院感染监测系统 * * 需要多少血量？ 血液中细菌和真菌的最佳检出率依赖于培养所需的足够的 血量。采集充足血量能确保低浓度的致病性细菌或真菌的 检出。当怀疑心血管系统(例如：心内膜炎)感染的时候，这 是最基本的要求。 血培养物每增加一毫升，成年人血液的微生物的检出率增 加，直到增加到30毫升13。这归因于成人每毫升血较低数量 的菌落形成单位(CFU)3。 对各个血培养组合来说，要从血流感染的患者血液中培养 出微生物，增加血量是最显著的14。 * 美国全国医院感染监测系统 关于咳痰标本 在抗生素应用前采集痰标本; 标本采集后1～2h内必须立即进行实验室处理 咳痰标本应用最早且广泛，但也是最受争议的标本 取标本前应摘去牙托，清洁口腔如刷牙和漱口 深咳，采集标本过程中要有专业的医务人员指导 无痰可用3％～5％NaCl 5ml雾吸约5min导痰 也可用物理疗法、体位引流、鼻导管抽吸等法取痰 咳痰标本不合格，退检吗？ 如果低倍视野下鳞状上皮细胞小于10，白细胞大于25，为合格痰标本。如果超出该标准，应不做培养或仅在特殊要求下做。 如做培养，报告中注明“镜检结果表明标本口咽分泌物污染明显”。 痰培养的送检次数 对于普通细菌性肺炎，痰标本送检每天1次，连续2～3天。不建议24h内多次采集，除非痰液外观性状出现改变； 怀疑分枝杆菌感染者，应连续收集3天清晨痰液送检； 怀疑军团菌或深部真菌感染，痰标本理想的送检次数尚无定论。 痰培养的运送和保存 尽快（2h）送至实验室 如不能及时送达，应将标本暂存于4℃，但放置时间不可超过24h 厌氧培养标本的最佳运送时间取决于标本量 被口咽部菌群污染的标本如咳痰等不可用于厌氧菌培养 痰培养的拒收 光学显微镜细胞学检查发现口咽分泌物污染明显 没有标签或贴错标签 运送容器选择不当或有渗漏 标本采集不符合要求 同一天同一试验重复送检2次 延时送至实验室的标本 脑脊液标本 采集与运送 脑脊液标本的运送 常温立即送检，实验室收到标本后应立即接种。 脑脊液标本送检的理想时间为15分钟内，半小时送检是可接受的，如果送检时间超过1小时，则会影响结果，在结果报告时，在备注处注明此情况。 如不能及时送检，可使用血培养瓶（怀疑脑膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌感染时，请勿使用血培养瓶） 细菌培养的意义 培养阳性≠感染 排除污染 排除定植 任何结果都必须结合临床症状及其它相关检查进行综合分析 细菌培养的意义 培养阴性≠排除感染 标本采集部位和方法 是否在使用抗生素时留取的标本？ 标本运送时间和方法是否正确 标本接种、培养基及培养方法的选择是否正确 是否可能是厌氧菌或其它难培养的细菌感染 病原菌的耐药机制检测及培养 结果解释  超级细菌的广泛传播 2010年10月26日，宁夏两名患儿被检测出带有超级细菌NDM-1 XX地区产ESBLs菌株检出率（%） Imipenem、Meropenem对A.baumannii敏感率（%）变化 HB data 现在临床细菌的耐药趋势 90%葡萄球菌将是MRSA、MRS(耐甲氧西林：β-内酰胺类、β-内酰胺酶复合制剂、碳青霉烯类均耐药) 革兰阴性肠杆菌科细菌耐药性不断增加，并出现对碳青霉烯类耐药 MDR（多重耐药），PDR-AB（泛耐药鲍曼不动杆菌）不断增加，检测和治疗手段匮乏. 加强院感控制措施，主动筛选耐药菌，进行抗菌药物和耐药菌管理日趋重要！ 肠杆菌科细菌的耐药性 . 同时产ESBLs 、AmpC酶大肠埃希菌和克雷伯菌属的检出率分别为42.2% 和58.7% . 大肠埃希菌和克雷伯菌属中对氟喹诺酮类耐药率已达60%以上 . 已出现对碳青霉烯类耐药的肠杆菌科细菌 -产ESBL大肠埃希菌对IMP和MEM耐药率均为0.3% -产ESBL肺炎克雷伯菌对IMP和MEM耐药率均为1.5% -KPC、ESBL和/或AmpC酶合并膜孔蛋白的表达异常 . 肠杆菌科的某些种中已出现泛耐药菌 葡萄球菌的耐药机制及检测 葡萄球菌β-内酰胺类耐药 有两种关键耐药类型 ⑴产生可诱导的质粒介导β-内酰胺酶 ⑵mecA基因编码的PBP-2a导致对苯唑西林耐药 MRSA的问题 自动仪器检测 万古霉素的药敏试验和报告 病原诊断是合理应用抗菌 药物的基础 MIC规则 药敏试验常规抗菌药物的选择： 我国根据美国CLSI（临床与实验室标准化研究所）制定的标准进行，抗生素分成四组： A组：一级试验并常规首选报告的抗微生物药物。 B组：一级试验，临床使用的主要抗生素（尤其在院 内感染时）有选择报告的药物。 C组：补充试验，有选择报告的药物 U组：补充试验，仅用于泌尿道感染细菌的抗微生物药物 如何理解MIC值及药敏结果？ 高度敏感（S）：当一种细菌引起的感染