林蛙皮中提取胶原蛋白的方法比较本科论文 .doc

摘 要 中国林蛙，属于两栖类珍稀动物。中国林蛙以其独特的营养价值与药用价值日益受到人们的重视，是蛙类中最有经济价值的一种。林蛙富含多种氨基酸、激素、微量元素和维生素等营养成分，在药用、滋补和美容等方面都具有非常高的利用价值。 林蛙皮是摘取林蛙油后作为饲料或废弃物的物质。本研究立足于中国林蛙资源丰富以及蛙皮中含有大量生物活性物质这一优势，以干燥的林蛙皮为原料，用不同方法对林蛙皮进行胶原蛋白提取试验，利用羟脯氨酸比色法比较了几种方法的提取效果，得出最佳的提法方法，并通过单因素试验及正交试验对最佳提取方法进行优化。结果表明：酸法浸提是从林蛙皮中提取胶原蛋白的最佳方法，液料比为20:1，利用0.1mol/L柠檬酸在37℃下浸提48h为最佳工艺条件。 ：林蛙皮；胶原蛋白；方法比较；最佳工艺  Key words: Rana skin; collagen protein; comparison of methods; best technological conditions  目 录 摘 要 I Abstract II 目 录 III 第一章 前 言 1 第二章 文献综述 2 2.1 林蛙皮 3 2.1.1 林蛙皮的功能 3 2.1.2 林蛙皮中胶原蛋白 5 2.1.3 林蛙皮研究现状和应用前景 6 2.2 胶原蛋白 7 2.2.1 胶原蛋白的结构 7 2.2.2 胶原蛋白的功效 8 2.2.3 胶原蛋白的应用 11 2.2.4 胶原蛋白的发展趋势 13 2.3 胶原蛋白的提取方法 14 2.3.1 酸法 14 2.3.2 碱法 14 2.3.3 酶法 14 2.3.4 盐法 14 2.3.5 热水法 15 2.4 本论文的研究内容及研究意义 15 第三章 实验部分 16 3.1 材料与设备 16 3.1.1 原材料 16 3.1.2 主要仪器 16 3.1.3 主要试剂 16 3.2 林蛙皮中提取胶原蛋白试验方法 17 3.2.1 胶原蛋白的提取工艺方法 17 3.2.2 对二甲氨基苯甲醛法测定林蛙皮中胶原蛋白的含量 17 3.3 结论与讨论 19 3.3.1 羟脯氨酸标准曲线的绘制 19 3.3.2 胶原蛋白提取的试验结果比较与讨论 20 3.4 最佳提取方法的工艺优化 21 3.4.1 酸法提取溶剂的选择 21 3.4.2 单因素试验 22 3.4.3 正交试验 25 第四章 结论与展望 27 4.1 结论 27 4.2 展望 27 致谢 28 参考文献 29第一章 前 言 中国林蛙（Rana chensinensis），是我国山区，尤其是东北山区，包括长白山脉、小兴安岭大部、张广才岭腹地，纯野生动物，亦被称作哈什蚂（哈士蟆）。其与蛤蟆、田鸡完全是非同原动物。唯中国仅有，已被列为易危物种。是集药用、食补和美容功能于一体的珍稀两栖类动物[1]。 中国林蛙凭借其特有的营养价值与药用价值日益受到人们的重视，成为蛙类中最有经济价值的一种。在各地所产的林蛙中，以东北地区的林蛙体格大、产油率高、体制健壮、繁殖率高而成为林蛙中的极品。中国林蛙富含18种氨基酸、4种激素、13种微量元素和9种维生素[2]，在药用、滋补和美容方面都具有非常高的利用价值。林蛙的营养价值比较高，俗称“大补品”。由于其主要以昆虫类为食，因此又称“农林卫士”和“纯绿色食品”，在近些年市场上显现出了巨大的商机。 中国林蛙皮中含有丰富的胶原蛋白资源。胶原蛋白富含除半胱氨酸和色氨酸外的18种氨基酸，其中有7种是维持人体生长所必需的氨基酸，在胶原蛋白中甘氨酸占30％，而脯氨酸和羟脯氨酸含量共占约25％，是各类蛋白质中含量最高的，此外，丙氨酸和谷氨酸的含量也都比较高[2]，同时胶原蛋白还含括了一般蛋白质中极少见的羟脯氨酸和焦谷氨酸以及在其他种类蛋白质中几乎不存在的羟基赖氨酸。有资料报道：胶原蛋白肽可以被人体主动且无障碍吸收[3]。由此可见，胶原蛋白具有十分丰富的营养。 本课题立足于中国林蛙资源丰富以及蛙皮中含有大量生物活性物质这一优势[4]，以干燥的林蛙皮为原料，对从林蛙皮中提取胶原蛋白相关提取方法比较做重点研究。目前广泛采用的提取胶原的方法主要分为酸法、碱法、酶法、盐法以及热水浸提法5类。本课题以干燥的林蛙皮为原料,研究其胶原蛋白的酸法、碱法、酶法、盐法及热水法提取工艺条件,对比不同提取方法提取得到的胶原得率，比较出最佳的胶原提取方法，并通过单因素试验及正交试验对最佳的提取方法进行优化，从而得出最佳的工艺条件。 第二章 文献综述 中国林蛙（Rana chensinensis），俗称哈什蟆，在分类上属于两栖纲、无尾目、蛙科、蛙属[2]，主要分布在中国东北山区，包括长白山脉、小兴安岭大部等地，是纯野生动物，为国家二级保护动物[