实验五[1][1].细胞膜的渗透性及植物液泡系的显示.ppt

生物绘图 1．要求：细胞和组织绘图是根据显微镜下的观察内容绘制的，因此，首先要充分观察了解所绘材料的特点、排列及比例。选择有代表性的、典型的部位进行绘图。客观真实地反映材料的自然状态。即生物绘图要求具备高度的科学性和真实感，形态正确、比例适当、清晰美观。 2、用线条和圆点来完成全图。如，用线条描绘细胞壁与膜。用“点”表示明暗和颜色的深浅，给予立体感 3、不要只孤独的绘制一个细胞，要表现出显微镜下还有其他细胞的存在， 叶绿体的自发与次生荧光 加入吖啶橙后叶绿体的自发荧光（火红色）消失了？ 原因：是荧光淬灭现象所致。吖啶橙是一种芳香杂环阳离子染料可透过细胞膜，因此而推测吖啶橙阳离子是进入叶绿体膜内通过影响叶绿素分子的结构或所处的化学环境使自发荧光淬灭的。 　　 次生荧光产生的来由及作用机理推测 1、次生荧光产生的来由？ 根据实验原理中的一段话：“叶绿体吸附吖啶橙后可发出桔红色的荧光。”，另外，根据实验课堂中的介绍RNA的橙红色荧光产生是由于吖啶橙与RNA相互的静电吸引堆积在磷酸根上引起的。因此我们推测，叶绿体的次生荧光的来由，大部分来自叶绿体的吸附作用，极少部分来自叶绿体中的RNA（半自主性细胞器）。 2、为什么吖啶橙被吸附后会产生桔红色的荧光？ 通过查阅文献知道，在一定的酸性条件下，吖啶橙溶液的吸收与荧光光谱会伴随它的浓度不同而有迁移，低浓度时（1×10-6浓度），荧光光谱会蓝移，荧光为绿颜色，能量增加，当浓度由1×10-6提高到1×10-4时，荧光光谱会红移，此时发出的是橙红色荧光。光的能量减少，这些现象的产生与吖啶橙的结构有关，低浓度时主要以单体存在，较高的浓度则以二聚体或多聚体的形式存在。 参考文献：王以明，庞小峰，张玉玉等,吖啶橙受溶液pH和浓度变化的光谱研究.应用化工, 2009(4):509-513 文字的表述问题，有其是关于“渗透压”的描述 目的要求 通过红细胞的溶血过程的观察,了解分子量、脂溶性大小、电解质和非电解质溶液对细胞膜透性的影响。 掌握液泡系染色的原理和技术  基本原理 植物液泡系的活体染色 中性红为弱碱性染料，对液泡系(即高尔 基体)的染色有专一性，只将活细胞中的 液泡系染成红色，细胞核与细胞质完全 不着色，这可能是与液泡中某些蛋白质 有关。  细胞膜的渗透性 细胞膜在不断变化的环境中，必须 保持自身的稳恒状态，才能生存。细 胞膜允许一些物质通透，又能降低甚 至阻挡另一些物质的通透，所以细胞 膜具有选择通透性。水分子可以自由 通过细胞膜，当细胞处于低渗液环境 时，细胞很快吸水而胀裂，此时,血红 蛋白从红细胞中逸出的现象称为溶血 现象。溶血现象可作为测量物质进入 红血细胞速度的一种指标。在等渗液 中，由于有些溶质会进入红细胞内、 引起细胞渗透压升高，细胞也会吸水 胀裂，由于各种物质透入细胞的速度 不同，溶血的时间不同。 实验中溶血现象的判断是以光线能 否透过溶液来界定的。 实验用品 ?1．器材：显微镜、解剖盘、剪刀、镊子、注射器、载玻片、盖玻片、吸管等 2．试剂：0.85%生理盐水； 抗凝剂：肝素或Alsever； 等渗液：①0.17mol/L氯化钠、②0.32M 甲醇 , ③0.32M 乙醇 , ④ 0.32M 丙醇,⑤0.32M 乙二醇, ⑥ 0.32M 甘油，⑦ 0.32M 葡萄糖。  3．材料：10%鸡红细胞，黄豆根尖 实验步骤---细胞膜的渗透性 一、鸡血细胞悬液 取50ml小烧杯一只，加1份鸡血和10份0.17mol/L氯化钠溶液，形成一 种不透明的红色液体，此即稀释的鸡血悬液。 二、低渗溶液 取试管一支，加入10ml蒸馏水，再加入1ml稀释的鸡血，注意观察溶 液颜色的变化，由不透明的红色逐渐澄清，说明红细胞发生破裂造成 100%红细胞溶血，使光线比较容易透过溶液。 三、鸡红细胞的渗透性 1、取试管一支，加入0.17mol/L氯化钠溶液10ml，再加入1ml稀释的 鸡血，轻轻摇动，注意颜色有无变化？有无溶血现象？为什么？ 2、分别在另外6种等渗溶液中进行同样实验。方法同1。（若发生溶 血，记下时间（自加入稀释鸡血到溶液变成红色至透明澄清所需时间）。 实验步骤----植物液泡系的活体染色 1）取一干净载玻片，滴一滴1/3000中性红染液； 2）用刀片将初生的黄豆根尖（约1－2cm长）切一纵薄片，置染液中，染8分钟； 3）用吸管吸Ringer液或蒸馏水滴在染液周围，使染液冲淡，吸去再换水使染液近无色； 4）用盖玻片盖在样品上，吸去多余水份； 5）观察：在高倍镜下，先观察根尖部分的生长点的细胞，可见细胞质中散在很多大小不等的染成玫瑰红色的圆形