实验五红细胞沉降率嗜酸细胞计数.ppt

实验五 红细胞沉降率 嗜酸粒细胞直接计数 实验目的 通过实验熟练掌握静脉采血技术，红细胞沉降率的测定原理、方法和临床意义，掌握嗜酸粒细胞直接计数的原理，方法和临床意义。 采血步骤 1、按照实验要求，准备好相应的容器（抗凝管、试管等），核对患者编号和姓名。 2、采血时患者取卧位或坐位，手臂伸直平放在床边或台面上，暴露穿刺部位。 3、选择静脉，弹性好，有时看不见，但是能摸到，不选择过细的静脉。 4、先用碘酒棉签从内向外顺时针方向消毒穿刺处皮肤，再用75%酒精棉签以同样方式消毒。在采血部位上方约6cm的位置扎上压脉带，嘱患者握紧拳头，使静脉充盈显露。 5、操作者以左手固定静脉穿刺部位下端，右手持一次性注射器，使针头斜面和针筒刻度向上，先以30度角度迅速穿刺破皮肤，然后适当降低角度，针头放平再穿过静脉壁进入静脉腔中央。见回血后，将针头顺势深入少许，以免采血时针头滑出。此时，解开压脉带。 6、用右手食指将针头固定，左手缓缓抽动注射器，至需要血量时，放松拳头，用无菌干棉球压迫伤口，拔出针头。 7、取下针头，将血液沿着管壁缓慢注入容器中，防止产生气泡。 红细胞沉降率（erythrocyte sedimentation rate,ESR）是指红细胞在一定条件下沉降的速度而言，简称血沉。在健康人血沉数值波动于一个较狭窄范围内。在许多病理情况下血沉可明显加快。 （一）原理 血液中的红细胞，因为胞膜表面的唾液酸所具有的负电荷等因素而相互排斥，使细胞距离大，彼此分散，下沉速度缓慢。如血浆或红细胞自身发生改变，则可以使得血沉发生变化。血沉增加的关键是红细胞间相互排斥力减小。 将一定量的枸橼酸钠抗凝血置于血沉管中，直立于血沉架上，1h后读取红细胞下沉后血浆的高度。 （二）器材与试剂 1、血沉管：厚壁，笔直，无色，管长300+/-0.15mm，分度清楚，精密，标记线宽度一致。数字从0~200，并配有特制的血沉架。 2、抗凝剂：1.09mmol/L枸橼酸钠抗凝。 （三）操作 1、静脉采血1.6ml 2、加入到有0.4ml枸橼酸钠抗凝管中，立即充分混匀。 3、将血吸到清洁干燥的标准血沉管中“0”刻度处，排除气泡，垂直放到血沉架上，一小时后，读出血浆液面到沉降红细胞柱顶部之间的距离（mm），即为血沉结果。 （四）结果报告 mm/h 参考值 成年男性： 0～15mm／h 成年女性：0～20mm／h （五）注意事项 1、静脉采血相关注意事项。 2、用具要清洁干燥，吸血要顺利，防止溶血和凝血，使得血沉加快。 3、抗凝剂用量准确，不可因采血量不足而加大抗凝剂用量，影响结果。 4、温度对结果有影响，应控制在18~25度，温度超过应该校正。 5、应在采血后2h内完成试验。 6、血沉架必须垂直，倾斜会使得结果增加。血沉架应该放在避风、不被太阳直接照射，没有震动的平稳桌面上。 （六）临床意义 灵敏但缺乏特异性的指标： 病情动态观察 功能性/器质性病变区别 良恶性肿瘤鉴别 血液流变学指标 二、嗜酸粒细胞计数 （一）原理 利用嗜酸性颗粒非水溶性的特性，用嗜酸粒细胞稀释液将血液稀释一定倍数，同时破坏红细胞和大部分其它白细胞，并使嗜酸细胞着色，滴入细胞计数盘中，计数一定范围内嗜酸粒细胞数，即可求得每升血液中嗜酸粒细胞数。嗜酸粒细胞稀释液种类繁多，虽配方不同，但作用大同小异。分为保护嗜酸粒细胞而破坏其它细胞的物质和着染嗜酸粒细胞的物质（如溴甲酚紫、伊红、石楠红等），可根据本实验室的条件选择配制。 [参考值] （0.05-0.5）×109/L （二）试剂与器材 伊红-丙酮溶液 血细胞计数板 （三）操作 1、加0.38ul的嗜酸细胞稀释液 2、毛细血管采血20ul，充分混匀，充池（静置5min）。 3、高倍镜下计数上下两个计数池10个大方格内的嗜酸粒细胞。 4、计算： N /10 X10 X20 X106 （四）注意事项 1、半小时内计数完毕，防止细胞破坏 2、嗜酸粒细胞易破碎不能用力震荡 3、与残留中性粒细胞的区别（颗粒细小着色浅或无） 临床意义 嗜酸性粒细胞增多 过敏性疾病 寄生虫病 某些传染病及传染病恢复期 某些皮肤病 血液病 某些恶性肿瘤 嗜酸性粒细胞减少 某些急性传染病 激素应用 * LOGO