农残分析6-薄层.ppt

2）碘显色 将固体碘放在层析缸或干燥器底部，使碘蒸气挥发，将簿层板放入碘蒸气中，有的农药几秒钟或数分钟即显出黄色谱带，多数农药可以使用此法。 3）氯化钯显色 取0.1g氯化钯，溶解于5ml 0.1mol／L硫酸中，加水100m1，放置后，直接喷洒薄层板即可；含硫的农药都可用此法检出，谱带显黄棕色。 4）硝酸银—氢氧化铵显色 取l0ml 1 mol／L硝酸银溶液，加入5ml氨水，用丙酮稀择至200 m1，直接向展开后的薄层板喷洒，喷后在紫外灯下或日光下照射5min，含氯、溴的农药可显棕黑色谱带，但使用此显色剂会干扰银量法测卤素。 七、定 性 分 析 一、定性分析的依据：Rf值 二、举例： 八、定 量 分 析 薄层色谱的定量方法有两种，即直接测定法和溶出定量法。 直接测定法是在展开后的薄层上进行定量测定，方法简便快速，无须破坏薄层。 溶出定量法是待测物在薄层上定位或显色后、用工具将色斑处的薄层取下，用溶剂将组分萃取出来，再用适当的方法测定。 直接测定法：目测法、测面积法、薄层扫描仪法 溶出定量法：滴定法、极谱法、可见紫外分光光度法 薄层色谱法 原理 吸附剂 展开剂的选配 薄层板的制备 点样与展开 检出 定性分析 定量分析 概念： 薄层色谱法又称薄层层析法. 是利用色谱原理在薄层板上对混合物中各组分进行分离、纯化和分析的方法，是把吸附剂或载体均匀地铺在玻璃板上形成厚度一致的薄层，在其下端点加试样溶液后，放入底部带有溶剂(展开剂或移动相)的层析缸 中，展开剂在薄层板上移动至一定高度，使样本中各组分得到分离。 发展： 属液相色谱，从柱色谱和纸色谱发展而来，兼有两者的特点。 1938年伊马洛夫用氧化铝、氧化镁在薄层板上分离植物成分； 1949年梅赫特等首先用黏合剂研制性能稳定的薄层； 1957年斯塔尔改进了仪器，提出了吸附剂规格和操作方法； 20世纪60年代用于农药分析，1965年薄层色谱。 薄层色谱法的特点是： ①展开时间短；一般只需十至几十 分钟； ②分离能力强，谱带集中； ③灵敏度高，样品量很少时，点样几-几十微克即可以进行定性； ④显色方便； ⑤仪器简单，操作方便。 一、原理 按分离机制可以分为吸附、分配、离子交换及凝胶色谱法等，后两者在农药分析中极少应用。 1．分配色谱原理： （１）正相薄层分配色谱：以纤维素或水、缓冲液、极性有机溶剂处理过的硅胶为固定相，使用极性较弱的溶剂为流动相。 （２）反相薄层分配色谱：使用硅酮、石蜡等非极性的溶剂处理过的硅胶或纤维素作固定相，其极性很小，使用极性较强的溶剂作流动相。 ２．吸附薄层色谱法： 在农药分析中主要使用吸附薄层色谱法 （１）原理：由于样本各组分的理化性质不同，它们在吸附剂上的吸附作用也不同，各组分随展开剂由原点向预定的前沿移动时，在两相间反复进行吸附和解吸附，吸附强的组分难于被展开剂溶解下来，移动速度小，吸附弱的成分较易被展开剂解吸附，移动速度较大，移动速度的差别，使各成分分离。 各组分经展开后在薄层板上迁移距离的数值，可用比移值Rf 来表示。 原点即在薄层板上点加样本的位置，一般在玻板下端约2cm处。展开剂前沿是指展开剂移动的终止位置，同一农药在相同展开剂、吸附剂及相同环境条件下的比移值是不变的，可以作为农药定性的依据。 （2） 影响分离效率的因素主要有以下4点： a.展开剂的选择和移动速度：展开剂在一定的吸附剂上移动的速度与其极性和黏度有关，因此选择合适的溶剂或混合溶剂作展开剂达到适宜的展开速度是很重要的。 b.吸附剂的颗粒大小：吸附剂颗粒小，分辨率好；但展开速度慢，延长展开时间会增加分子横向扩散或拖尾现象，影响分辨效率； 为了获得较好的分离，吸附剂颗粒大小与展开的长度要协调好； 如果颗粒大展开剂推动过速而影响分离效果，则展开距离要延长；市售预制板颗粒直径为10~15微米，预制高效薄层板