《临床生物化学检验》蛋白质与非蛋白含氮化合物检验.ppt

四、病例分析 【临床诊断】酒精性肝硬化伴腹水。 【诊断依据】 血清ALB＜25 g/L，胆红素和氨基转移酶增高，说明肝功能明显下降，结合蛋白电泳结果和Ig增高，可诊断为肝硬化。 Ig增高以IgA幅度最高，结合其HBsAg（-）及嗜酒史，初步判断为酒精性肝硬化。 凝血功能和Fg明显下降，说明肝功能已严重障碍，病史、B超及ALB浓度，均说明患者已出现腹水。 本章小结 血浆蛋白质有多种功能，PA即TTR能转运甲状腺激素，并结合携带视黄醇的RBP；ALB是最重要的血浆营养蛋白和血浆载体蛋白；AAT是最重要的蛋白酶抑制物；AAG是主要的APP；Hp结合Hb并防止Hb从肾脏丢失；α2MG也是主要的蛋白酶抑制剂；血浆铜95％存在于Cp中；TRF携带铁在血液中运输；CRP能结合异物并激活补体。 本章小结 氨基酸代谢紊乱有遗传性和继发性，表现为氨基酸血症和氨基酸尿症，遗传性为代谢酶缺陷，种类很多。 高尿酸血症可分为原发性和继发性两类，主要病因为嘌呤代谢紊乱、尿酸排泄障碍、代谢综合征相关、高嘌呤饮食、各种肾脏疾病和细胞破坏增多。 本章小结 双缩脲法测定血清TP，邻苯三酚红钼法常测定尿液TP。 血清ALB可用BCG法或BCP法测定，其下降在临床多见。 异常血清蛋白质电泳图谱类型较多， 其中肾病型、肝硬化型和M蛋白型较典型。 IFE能确定蛋白质的单克隆属性，诊断浆细胞病等。 体液中个别蛋白质测定多采用免疫比浊法， 其中15种蛋白质已有国际公认的标准参考物质。 体液氨基酸有定性过筛试验，定量测定可采用HPLC法。 体液尿酸常采用尿酸酶-过氧化物酶法，还原性物质对其结果有负干扰。 本章小结 血浆蛋白质在临床上应用较多，肝脏疾病时ALB、PA、胆碱酯酶等下降，PT延长和Ig升高；年青肺气肿者AAT可能缺陷，wilson病时可能Cp减少；缺铁性贫血者TRF升高，溶血性贫血时Hp减少。 APR时血浆蛋白质有正向APPs和负向APPs；某些器官或组织病变时某种血浆蛋白质含量增高。 遗传性氨基酸代谢紊乱最常用体液氨基酸检测。 血清尿酸＞420μmol/L(绝经前女性＞350μmol/L)为高尿酸血症，并可引起痛风，尿液尿酸有助于分析高尿酸血症是生成过多型还是排泄减少型或是混合型。 谢　谢！ * * 五、体液个别蛋白质 【临床意义】 10. 血浆CRP （2）做为心血管疾病的独立危险因子 为血浆CRP低浓度增高，须用更灵敏测定方法 大多健康成年人1mg/L 作为心血管疾病危险因子的标记： 1mg/L 为低风险 1.0～3.0mg/L 为中度危险性 3.0mg/L 为高度危险性。 五、体液个别蛋白质 【方法评价】免疫比浊法 检测限为10～20mg/L 精密度较好，批内变异系数通常小于5％ 需加促聚剂聚乙二醇加速大的免疫复合物形成 抗原或抗体量大大过剩时易出现可溶性复合物 受血脂影响，尤其是低稀释度时，脂蛋白的小颗粒可形成浊度，使测定值假性升高。 五、体液个别蛋白质 【方法评价】 免疫化学法已应用于许多体液蛋白质测定 ALB、PA、AAT、AAG、HAP、AMG、CER、TRF、CRP、IgG、IgM、IgA、C3、C4和α1抗糜蛋白酶共15种蛋白质均已有国际公认的标准参考物质CRM470（Certified Reference Material）。 免疫球蛋白轻链κ和λ、β2-mG、α1- mG、RBP、IgD、IgE等，也可采用免疫比浊法测定 六、体液氨基酸（一）过筛试验检测氨基酸 1．氨基酸薄层层析 能将体液中氨基酸分离，并常用茚三酮显色 大多数氨基酸与茚三酮反应呈紫色 六、体液氨基酸（一）过筛试验检测氨基酸 试验和颜色 被检测的代谢物 被检测疾病 三氯化铁 暗蓝绿（持久） 苯丙酮酸 苯丙酮酸尿症 绿（短暂） 对–羟苯丙酮酸 酪氨酸血症 蓝（短暂） 尿黑酸 尿黑酸尿症 灰绿 咪唑、丙酮酸 组氨酸血症 灰蓝 支链酮酸 支链酮酸尿症 蓝绿 5-羟吲哚乙酸 类癌 紫色 水杨酸盐 （干扰物） 紫褐 吩噻嗪 （干扰物） 氰化物/硝基氰酸盐 樱桃红 胱氨酸 胱氨酸尿症 同型胱氨酸 同型胱氨酸尿症 胱氨酸–同型胱氨酸二硫化物 同型胱氨酸尿症 青霉胺-胱氨酸二硫化物 （治疗） 2,4-二硝基苯肼 黄白色 支链酮酸，苯丙酮酸 支链酮酸尿症，苯丙酮酸尿症 亚硝基萘酚：橙红色 酪氨酸及其代谢物 酪氨酸代谢紊乱，酪氨酸血症 2．尿氨基酸颜色试验 六、体液氨基酸（一）过筛试验检测氨基酸 3.Guthrie微生物试验 琼脂培养基中含有能特异针对某种待检氨基酸的竞争性抑制剂，结构与待检氨基酸相似。 将枯草芽孢杆菌芽孢加入，样品点到纸片上并放到琼脂表面，琼脂板孵育后观察