医院环境卫生监测方法和报告方式新进展.ppt

四、使用中消毒液染菌量测定 1、消毒剂的采样和稀释 用无菌吸管或注射器按无菌操作方法吸取1.0mL被检消毒液，加入9mL含中和剂的各类稀释液 中和剂中所用PBS液为： 0.03mol/L的pH7.2~7.4磷酸盐缓冲液 (PBS)，配法见前。 2、中和剂的选择 ◆醇类与酚类消毒剂用普通营养肉汤中和； ◆含氯消毒剂、含碘消毒剂和过氧化物消毒剂用含 0.1%硫代硫酸钠的PBS液中和； ◆洗必泰、季铵盐类消毒剂用含0.3%吐温80和0.3%卵磷脂的PBS液中和； ◆醛类消毒剂用含0.3%甘氨酸的PBS液中和； ◆含有表面活性剂的各种复方消毒剂可在中和剂中加入吐温80至3%（W/V)；也可使用该消毒剂消毒效果检测的中和剂鉴定试验确定的中和剂。 3、检测方法 （采样后须4小时内外理完标本） 1、用无菌吸管吸取一定稀释比例（如1∶10)的中和后混合液1. mL加到无菌空平皿中，再将冷至40℃～45℃的熔化营养琼脂培养基每皿倾注15mL～20mL，36℃±1℃恒温箱培养72h，计数菌落数；必要时分离致病性微生物，进行目标微生物的检测。 2、消毒液染菌量(cfu/ml)＝平均每皿菌落数×10 （1）计算菌落数为0时，报告为：无菌生长 （2）0＜计算菌落数≤100时，报告为：实际菌落数cfu/ml （3）计算菌落数＞100时，报告为：菌落数＞ 100cfu/ml 3、结果判断：使用中灭菌用消毒液：无菌生长；使用中皮肤黏膜消毒液染菌量：≤10cfu/mL，其它使用中消毒液染菌量≤100cfu/mL。 注：填写报告单结果时应注明“合格”或”不合格“，或附上相应项目的标准要求参考值 五、清洁用品消毒效果监测 采样时间: 消毒后、使用前进行采样 采样方法：布巾、地巾等物品可用无菌的方法剪取 1cm×3cm，直接投入 5ml 含相应中和剂的无菌生理盐水中，及时送检。 检测方法：将采样管在混匀器上振荡20s或用力振打 80 次，取采样液检测致病菌。 结果判断和报告：未检出致病菌为消毒合格。 致病菌的检测：当怀疑被某致病菌污染时，或怀疑医院感染与某致病菌有关时，致病菌的检测依据污染情况进行相应指标菌的检测。检测方法参考相关标准。 六、内镜的消毒效果监测 采样时间：在消毒灭菌后、使用前进行采样 采样方法：监测采样部位为内镜的内腔面。用无菌注射器抽取10mL含相应中和剂的洗脱液，从待检内镜活检口注入，用无菌试管从活检出口收集，及时送检，2小时内检测。 菌落计数：将送检液充分震荡混匀，取1mL， 加入直径90mm无菌平皿，再加入已经熔化的45℃-48℃营养琼脂15mL-18mL，边倾注边摇匀，待琼脂凝固，于36 ±1℃培养48小时后计数。必要时分离致病性微生物，进行目标微生物的检测。 结果判断：菌落数/件=平皿菌落数×10 cfu/件 （1）计算菌落数为0时，报告为：无菌生长 （2）0＜计算菌落数≤20时，报告为：实际菌落数cfu/件 （3）计算菌落数＞20时，报告为：菌落数＞ 20cfu/件 消毒后的内镜合格标准为： 消毒后内镜细菌总数合格者应20cfu/件，且不能检出致病菌； 灭菌后内镜合格标准为：无菌检测合格。 注：填写报告单结果时应注明“合格”或”不合格“，或附上相应项目的标准要求参考值 军团杆菌 在分类学上是一种独特的需氧革兰染色阴性杆菌，无荚膜，在普通培养基上不生长（高度怀疑军团菌感染时，应用特殊培养基进行目标菌检测），在静止的水源或人工管道中，如淋浴喷头、温泉游泳池、冷却塔（空调系统）或下水道生长、繁殖，并感染人群。至今已分离出30余种军团杆菌，其中至少19种可致肺炎，并有50余种血清型，但可以引起人类肺炎的军团菌最多见的为嗜肺军团菌1、6、4血清型和米克戴德军团菌。 吸烟、有慢性肺部疾病和免疫功能低下，是该病的三大危险因素。 各种年龄均可发生军团菌感染，但老年人多见，患慢性基础性疾病患者及免疫低下者易发生军团菌感染。通常，医院内军团菌感染患病率较高，病死率可高达50%。 军团菌在人体细胞内繁殖，抗菌药物需要达到肺泡内才能更好杀灭细菌，需选用脂溶性强的抗菌药物才有效。 首选红霉素类如阿奇霉素，克拉霉素等，疗效最为可靠。此外，强力霉素、利福平、磺胺类药及氟喹诺类药物亦可选用。其它如亚胺培南等碳青霉烯类。 氨基糖甙类抗生素、青霉素和头孢菌素对本病无效。 谢谢！ * 医院环境卫生监测方法和报告方式新进展 江西省肿瘤医院院感科 袁水斌 如何正确对医院环境进行监测和报告结果？ 一、物体表面消毒效果的监测 二、手卫生效果的监测 三、空气消毒效果的监测 四、使用中消毒液染菌量测定