HPLC法测定注射用炎琥宁含量.docVIP

HPLC法测定注射用炎琥宁的含量 　　摘 要：目的：应用HPLC法对于注射用炎琥宁含量进行测定，验证HPLC法测量的有效性以及可靠性。分析法用于注射用炎琥宁含量测定以及生产监督过程的可行性。方法：应用AgilentZorboxC18（5μm，250mm×4.6mm）作为测量中的色谱柱，应用pH值为2.5的0.05%的磷酸二氢钾溶液-甲醇（350：650）作为试验中的流动相，实现对于注射用炎琥宁的含量进行分析，同时应用外标计算法对于炎琥宁的主峰位置以及峰面积进行分析。结果：通过对于实验的分析可以知道，应用此方法进行含量测定，可以有效的保证药品回收率，最高可以达到98.4%，证明其对于注射用炎琥宁的含量测定是可行的。结论：应用HPLC法进行注射用炎琥宁含量的测定，可以很好地保证测量结果的准确性，并且测量方法简单可靠，相较于传统含量测量方式具有很强的优势性 关键词：HPLC；高效液相色谱仪 注射用炎琥宁主要是应用在病毒性的肺炎、病毒性的呼吸道感染的病人临床治疗上，其主要是由穿心莲的提取物进行脱水、蜡化以及成盐制作而成的药品，其中含有的可特异性兴奋垂体-肾上腺皮质功能可以实现对于患者早期毛细血管通透性的增高，有效地抑制患者体外的病毒活性，在目前的临床治疗中，通常是应用紫外分光光度的方法对于注射用炎琥宁含量进行测定的，但是其测定精度较差，并且测定的方式较为繁琐，所以已经开始不能使用现代社会的发展需求。本文主要是采用了HPLC法对于注射用炎琥宁的含量进行了测定，以验证其测量准确度以及有效性 1 仪器与试剂 1.1 试验仪器。在本文的注射用炎琥宁含量测定过程中，主要应用的试验仪器有两种，分别是1260型的安捷伦高效液相色谱仪以及XSE105型的梅特勒电子分析天平。在试验中主要应用的就是此两种仪器，并没有涉及其他试验仪器 1.2 应用试剂介绍。色谱甲醇（天津永大化学试剂有限公司）、磷酸二氢钾（分析纯，天津光复科技发展有限公司），脱水穿心莲内酯琥珀酸半酯对照品（中国食品药品研究检定院，批号：111598-201009），含量：99.5%。注射用炎琥宁批号：150307、150309、150311，规格：200mg，安徽宏业药业有限公司提供 2 实验方法与结果 2.1 色谱条件。色谱柱：AgilentZorbaxSB-C18（5μm250mm×4.6mm）；流动相：0.05%磷酸二氢钾（pH2.5）：甲醇（350：650）；检测波长：251nm；进样量：10μL；流速：1.0mLmin-1 2.2 检测波长的选择。以流动相为空白，以含量测定项下的脱水穿心莲内酯琥珀酸半酯对照品溶液为试样进行光谱扫描，测得脱水穿心莲内酯琥珀酸半酯在250.5nm处有最大吸收，确定为251nm 2.3 测定方法。①对照品溶液的制备：取经过减压干燥12h的脱水穿心莲内酯琥珀酸半酯对照品适量，精密称定20mg，置100mL容量瓶中，用流动相溶解，制成1mL中含0.2mg的溶液。②样品溶液的制备：精密称取注射用炎琥宁（约相当于炎琥宁114mg）至50mL容量瓶中，加流动相适量使溶解并稀释至刻度，摇匀，再精密量取5mL至50mL容量瓶中，加流动相至刻度，摇匀，即得。③空白溶液的制备：按样品溶液的制备方法制备空白溶液 2.4 线性关系的考察。取经过减压干燥12h的脱水穿心莲内酯琥珀酸半酯对照品适量，精密称定，制成浓度分别为20.1828、40.3656、100.914、201.828、241.582、305.8μgmL-1的溶液，按10μL分别进样，以峰面积为横坐标，浓度为纵坐标进行线性回归，得回归方程：Y=0.08856X+0.3814，相关系数R为0.99999（见表1） 2.5 精密度试验。取对照溶液按上述色谱条件连续进样6次，从色谱分析得出该方法的精密度良好 2.6 重复性试验。取注射用炎琥宁一批（批号：150307，规格：200mg），制备6份样品溶液，经色谱分析，得出本品的重复性良好 2.7 稳定性试验。取注射用炎琥宁一批（批号：150307，规格：200mg），配制成溶液，分别在0、0.5、1、2、4、6h后进样分析，得出样品溶液在6h内稳定无改变 2.8 回收率试验。取已知含量为0.258mgmL-1的样品（进行重复性试验的样品1）为基液，加入对照品，做加样样品回收率试验，得出上述方法测定注射用炎琥宁含量的准确度是可靠的。（见表2） 2.9 实验结果分析。（1）检测波长的选择。鉴于炎琥宁是从植物中提取精制而得，且杂质结构与主成分结构类似，在UV图谱中吸收情况接近或类似，通过结合紫外分光光度计记录的紫外吸收曲线图，最终确定最大吸收波长为251nm。（2）流动相的选择。最终实验选择了0.05%磷酸二氢