发育毒理学-20150513课件.ppt

* * * * 分别将20只NF51期非洲爪蟾蝌蚪暴露于不同浓度的DBP、MBP（2、10、15 mg/L）、1nM T3(阳性参照)以及0.005%DMSO(溶剂对照)中21天。染毒后判断所有实验组蝌蚪的变态发育期数，测量体长、眼距和体尾比。15mg/L DBP和15mg/L MBP染毒组蝌蚪的平均变态发育期分别为54和53期，且15mg/L DBP以及10mg/L、15mg/L MBP组蝌蚪体长显著小于对照组。 DBP和MBP能够显著抑制蝌蚪的变态发育，且MBP比DBP具有更强的抑制能力。 * * inner cell mass (ICM) trophectoderm (TE) total cell number (TCN) * 发育毒性资料的使用-常见有致畸作用的10类药物 抗惊厥和抗癫痫药：苯妥英钠可引起先天性畸形：短鼻，鼻梁宽而扁平、眼距过宽、眼睑下垂、斜视、短颈、唇裂或腭裂、小头畸形、智力低下等。苯巴比妥类与苯妥英钠类合用可能加重致畸作用， 碳酸锂：治疗躁狂症的常用药物。特别是心血管畸形的发生率明显高于正常人群。 * 己烯雌酚：治疗更年期综合征。可引起新生儿生殖器畸形。大部分畸形在青春期开始显现，90%以上在15-28岁有明确诊断，平均年龄为19 岁。 口服避孕药：是目前使用最广泛的女性避孕方法之一。但孕妇使用此类药物可引起包括肢体、心血管和神经系统的多种畸形。 * 抗生素：链霉素可能导致新生儿第八对脑神经损害，其损害程度与使用时间有关。四环素可引起胎儿牙齿和骨骼发育不全。 维生素A类：具有广泛的生物活性和重要生理功能。过量的维生素A类可引起不同种属实验动物的先天性畸形，妊娠期每日5000国际单位维生素A的需求完全可在摄食中获得，不必另外补充。一次大剂量或长时间大剂量服用均属不当。 抗凝药：维生素K、肝素和香豆素类等临床常用的抗凝药中香豆素已被肯定具有致畸作用。 * 抗恶性肿瘤药：甲氨蝶呤已肯定具有致畸作用，引起畸形的机制是干扰人体叶酸代谢，补充适量的叶酸可能有预防作用。 糖皮质激素：妊娠早期使用糖皮质激素的孕妇，可引起新生儿腭裂。地塞米松、倍他米松和去炎松能使小鼠产生腭裂，而强的松龙和氢化可的松很少使小鼠产生腭裂。 抗甲状腺药：硫氧嘧啶类抗甲状腺药可使先天性畸形增加，表现为头皮和头发缺损。 * 前苏联切尔诺贝利核电站 物理因素的发育毒性 * 10倍：绿色和平组织称切尔诺贝利核泄漏危害被低估10倍； 800年：专家称消除切尔诺贝利核泄事故漏后遗症需800年； 9.3万人：20年前的切尔诺贝利核电站事故造成致癌死亡人数约为9.3万人左右； 27万人：27万人因切尔诺贝利核泄漏事故患上癌症，其中致死9.3万人； 34万人：核泄漏事故发生后，前苏联立即疏散了11万多人，随后数年，又从污染严重地区搬迁了23万人，前后共疏散34万余人； 20亿人：建立在白俄罗斯国家科学院研究成果上的报告说，全球共有20亿人口受切尔诺贝利事故影响。 * 20年过去了，切尔诺贝利核事故造成的生态灾难后果远未消逝。乌克兰全国4800万人口中，目前共有包括47.34万儿童在内的250万核辐射受害者处于医疗监督之下。导致甲状腺癌的发病率增加了10倍多。更令人担忧的是，核辐射受害者中残疾病例上升：1991年至今，核事故导致残疾的人数增加了1.6倍，达10万人。而核事故发生时1岁至18岁的受害者健康问题最为突出，这一群体甲状腺癌的发病率比核事故前高10至60倍。 * 三、发育毒性的替代试验 实验方法的限制 动物福利的需要 实验准确性的要求 * 替代方法的概念与内涵 在生物医学研究、检测或教育中凡是能替代实验动物、减少所需动物数量或使动物实验程序得以优化而减少动物痛苦的任何一种方法或程序，都被认定为是替代方法（Alternatives methods） 代替替代（Replacement alternative） 减少替代（Reduction alternative） 优化替代（Refinement alternative） 包括用组织学、胚胎学、细胞学或计算机等方法取代整体动物实验，以低等动物取代高等级动物 * 替代的基本方法 体外技术及人类模型的应用 不依赖于完整动物的使用，如原代培养细胞、组织和器官、细胞系等 人类组织库、捐献器官、尸检材料等 人类胚胎干细胞 低等物种的利用 植物、细菌、真菌、昆虫或软体动物等 秀丽线虫(Caenorhabditis elegans) 斑马鱼(Danio rerio, Zebrafish) 物理化学方法与计算机的使用 QSAR 模型 * 三、发育毒性的替代试验—预筛试验 体外预筛试验 由于删除了母体毒物动力学、生物转化，以及胎盘屏障的影响，因此其可靠性受到一定的怀疑 * 而对于不存在母体毒性的