亲和膜分离陈嘉欣100510005210应化.ppt

随着生物工程和生命科学的迅速发展，其对生物大分子纯化的要求越来 越苛刻，为获得高纯度、高质量、低成本的产物的产品，亲和膜分离技术出现了。本文主要介绍了亲和膜的概念、分离原理、制备和亲和膜的应用及展望。 分离原理 亲和膜分离又称膜亲和层析，是一种利用亲和配基修饰的膜（亲和膜）为介质的分离纯化生物大分子的技术，是膜分离技术和亲和层析技术的有机结合。其分离过程 包括亲和吸附、洗脱、亲和膜再生等步骤。多采用错流方式，达到分离与浓缩之双重目的。该技术的关键是制备适宜的亲和膜。具有传质阻力小、达到吸附平衡的时 间短、配基利用率高、设备体积小等优点。膜污染等导致吸附效率低、膜寿命下降是其主要问题。可实现生物大分子的高效、大规模分离纯化。如以A蛋白为配基的 亲和膜全自动分离纯化系统可一步完成除菌、纯化和浓缩操作，用于纯化小鼠单抗的速度可达传统层析法的100倍。 ①分离膜的改性 即通过适当的化学反应，在膜表面接上可反应的官能团或者是一定长度的“间隔臂”(3个碳原子的化合物)。 ②亲和膜制备 选用一个适合的亲和配基，在一定条件下让其与间隔臂分子产生共价结合，生成带有亲和配基的膜分离介质。 亲和膜的制备方法 ③亲和络合 将样品混合物缓慢地通过膜，使样品中欲分离的物质与亲和配基产生特异性相互作用，产生络合，生成配基和配位物为一体的复合物，其余不和膜上配基产生亲和作用的物质则随流动相通过膜流走。 ④洗脱：改变条件，加洗脱液的组成、pH值、离子强度、温度等．使复合物产生解离并将解离物收集起来．进一步处理。 ⑤亲和膜再生：将解离后的亲和膜进行洗涤、再生、平衡，以备下次分离操作时再用。 亲和膜分离技术的应用 随着生命科学和生物工程的迅速发展，对生物大分子纯化分离的要求越来越高。对一些分子量相差很小的大分子就要用亲和戒指所具有的特异性将其分离出来。目前，亲和膜分离技术已应用于单抗、多抗、胰蛋白酶抑制剂的分离以及抗原、抗体、血清白蛋白、胰蛋白酶、干扰素等的纯化。 亲和膜分离技术的发展和成熟应用，极大地推动了热敏物质（蛋白质、酶、维生素、中草药等）和分子量相近物质（同分异构体、同系物等）分离技术的发展。 亲和膜分离技术的应用 将水解后的尼龙66微孔膜用二溴丙烷活化，接上己二胺作间隔臂，再用戊二醛法固载上组氨酸，制得的亲和膜可成功地去除氨基酸注射液、牛血清蛋白、溶菌酶等医药制剂中的内毒素，去除率在90％以上； 采用酰化一胺化和氯甲基化一胺化等途径对聚砜膜进行改性，在芳环上引入末端氨基，制得的亲和超滤膜已被用于胰蛋白酶的固载化和对其抑制剂的亲和分离。 亲和膜分离 10应化 陈嘉欣 1005100052 分离技术 分离原理 亲和膜分离分离步骤 亲和膜的制备 亲和膜的作用机理 亲和膜分离技术的应用 1 2 3 4 5 标题 2 3 5 亲和络合 洗脱 亲和膜制备 亲和膜分离步骤 亲和膜再生 4 1 分离膜的改性 亲和膜的作用机理 亲和膜分离分离过程图