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微生物学实验 段作营 樊 游 教学目标 加深对微生物学理论教学内容的理解和感性认识; 掌握微生物学研究的基本方法和微生物学实验的基本操作和基本技能; 培养观察、分析和解决问题的能力及 实事求是、严肃认真的科学态度。 教学内容及安排 微生物学的基本实验技术 微生物形态观察技术(显微技术、微生物制片与染色技术等); 微生物纯培养技术(微生物分离纯化技术、无菌操作技术、培养基制备与灭菌 以及微生物培养方法等); 微生物生理实验技术(生长的测定、生理 生化试验、细胞组分的分离分析技术等); 微生物遗传实验技术(单独安排课程) 课程考核 考核方式:考查 考核等级:五分制; 评分标准: 预习与方案制定(设计性实验) 10%; 实验态度与实验操作(重点实验考核) 40% 实验结果与实验报告 50% 实验报告内容与格式 台头部分:姓名、学号、实验名称 正文部分: 目的要求: 实验材料:菌名用中文和拉丁文书写,注意书写规范 实验原理:既要全面又要简单明了 实验步骤:可以采用实验流程示意图,对关 键步骤进行重点说明 实验结果与分析(图或原始数据、数据处理、 结果和/或结论、结果分析、实验心得体会等) 思考题 生物作图规范 实验一 酵母细胞形态的观察、酵母细胞的染色鉴别 实验目的 掌握显微镜的正确使用及维护方法 掌握酵母标本的制作方法 观察各种典型酵母细胞形态 学会酵母细胞死活鉴别染色方法 实验材料 菌种:酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae、 球拟酵母 Torulopsis sp、 八孢裂殖酵母 Sachizosaccharomyces octospora 染色液:0.1%美蓝染色液 其他:显微镜、载玻片、盖玻片、擦镜纸、吸水纸等 原理:显微镜的成像原理、美蓝染色原理(略) 实验步骤: 水浸片观察(除酿酒酵母外其他酵母) 制片:取1滴菌悬液,置于载玻片中央→从侧面加盖玻片(防止气泡)→吸去多余水分 显微观察:将制作好的水浸片置于显微镜的载物台上→低倍镜观察→高倍镜观察(注意观察各种酵母的细胞形态和繁殖方式) → 绘图记录。 美蓝染色(酿酒酵母) 染色:滴1小滴美蓝染色液于载玻片中央→再加一小滴酿酒酵母培养液→混匀→从侧面加盖玻片→吸去多余水分 显微观察:将制作好的染色片置于显微镜的载物台上→ 放置3min→低倍镜观察→高倍镜观察→ 绘图记录(颜色 和菌体形态)。 五. 实验内容 制作酵母水浸片,镜检观察: 细胞形态,繁殖方式 注意:显微镜的正确使用方法 六. 实验结果报告与思考题 1. 绘出所观察酵母的形态图(轮廓图)。 2. 书P451 3 显微镜下的酵母细胞形态 酵母菌子囊孢子和假菌丝 * * 微生物生理学实验(综合) 8(12) 酵母菌细胞总数和大小的测定 5(9) 酒曲或其它样品中微生物的分离纯化(设计) 9(14) 水的卫生细菌学检验(综合) 7(11) 培养基制备与灭菌 6(10) 霉菌的形态观察 4(8) 细菌的革兰氏染色及芽孢染色 3(7) 细菌的单染色及细胞形态观察 2(4) 酵母细胞形态的观察、酵母细胞的染色鉴别 1(3) 实验名称 序号(周次) 蓝色 芽细胞 母细胞(无色) Saccharomyces cerevisiae 40×16 * * *
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