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植物细胞工程常用的技术手段有哪些? 那么动物细胞常用的技术手段呢? 动物细胞工程的技术手段 动物细胞培养、动物细胞核移植、 动物细胞融合、生产单克隆抗体等 从动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。 原代培养: 传代培养: 1、无菌、无毒的环境: 动物细胞培养的条件 1、无菌、无毒的环境: 2、营养: 动物细胞培养的条件 1、无菌、无毒的环境 2、营养 3、温度和PH 动物细胞培养的条件 1、无菌、无毒的环境 2、营养 3、温度和PH 4、气体环境: 如何使动物细胞的全能性表达出来? 动物核移植: 将动物的一个细胞的细胞核,移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中,使其重组并发育成一个新的胚胎,这个新的胚胎最终发育为动物个体。分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植(难度高) * * * * 回 顾 2.1.2植物细胞工程的实际应用 一、植物繁殖的新途径: 1.微型繁殖: (1)微型繁殖技术:快速繁殖优良品种的植物组织培养技术 (2)特点:保持优良品种的遗传特性;高效快速地实现种苗的大量繁殖 2.作物脱毒: (1)材料: 无病毒的茎尖 (2)脱毒苗: 切取茎尖进行组织培养获得 3.人工种子: (1)特点:后代无性状分离;不受气候,季节和地域限制 (2)技术:植物组织培养. (3)结构:人工种皮、 胚乳、胚状体或不定芽或顶芽或腋芽. 二、作物新品种的培育: 1.单倍体育种: (1)方法:花药的离体培养;秋水仙素诱导 (2)优点:后代都是纯合体,稳定遗传;明显缩短育种年限 2.突变体的利用: (1)产生: 植物组织培养 (2)利用: 筛选对人们有利突变体,进而培育新品种 三、细胞产物的工厂化生产 1.种类:蛋白质,脂肪,糖类,药物,香料,生物碱等. 2.技术:植物的组织培养. 2.2 动物细胞工程 2.2.1 动物细胞培养和核移植技术 植物组织培养 植物体细胞杂交 问题探讨 动物细胞工程技术的基础 动物细胞培养 原理: 细胞增殖 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官(取材) 细胞悬液 10代细胞 50代细胞 传代培养 无限传代 单个细胞 加培养液 (分解细胞间的蛋白) 原代培养 胰蛋白酶或胶原蛋白酶 剪碎 细胞株 细胞系 动物组织细胞间隙中含有一定量蛋白质 遗传物质未改变 遗传物质已改变 细胞株和细胞系的区别: 1、遗传物质:不同 2、培养代数:不同 细胞株:10到40、50代的细胞, 遗传物质 没发生改变。 细胞系:超过50代的细胞,遗传物质发生 改变,可无限增殖。 原代培养与传代培养的区别 分装之前,10代以前 分装后继续培养,10代以后 动物细胞培养的条件 添加一定量的抗生素 定期更换培养液 培养液和培养器具无菌处理 补充合成培养基中缺乏的物质 葡萄糖、氨基酸、无机盐、微量元素、促生长因子、动物血清、血浆等 培养基的不同是动物细胞培养和植物组织培养最重要的区别 36.5 +0.5度 PH为7.2-7.4 O2和CO2 (95%空气和5% CO2 ) 2、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织 做动物细胞培养材料? 1、较植物组培培养基有何独特之处? 独特之处有: 1、液体培养基. 2、成分中有动物血清等. 这些组织或器官上的细胞生命力旺盛,分裂能力强 3、为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞? 防止细胞间接触抑制现象,使细胞与培养液更充分接触 4、动物细胞培养能否像绿色植物组织 培养那样最终培养成新个体? 不能,动物细胞培养只能使细胞数目增多,而不能发育成个体 5、胰蛋白酶能将细胞消化掉吗? 能 6、动物细胞培养过程中特别要注意什么? 注意时间的控制 7、能够用胃蛋白酶代替胰蛋 白酶吗?为什么? 不能,因为两者的最适PH不同,而正常组织细胞的生存环境与胰蛋白酶的最适PH较接近 动物细胞培养 植物组织培养 植物细胞的全能性 细胞株、细胞系 植物体或组织 获得细胞 或细胞分泌蛋白 快速繁殖、培育无病毒植株等 葡萄糖、动物血清 蔗糖、植物激素 液体培养基 固体培养基 细胞增殖 培养结果 培养目的 培养基特有成分 培养基性质 原理 (1)生产蛋白质生物制品:病毒疫苗、干扰素、
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