贝克曼离心分离系统ppt.pdf

贝克曼离心分离系统 主要内容 1 离心方法的选择 2 转头的选择 3 应用领域简介 5 4 使用注意事项 离心机分类 离心机 超速离心机 高速离心机 低速离心机 （转速超过30,000 rpm ） (10,000 rpm~30,000 rpm) （转速低于10,000 rpm） 分离小于500S的颗粒 分离500S—20,000S 的颗粒 分离大于20,000S 的颗粒 离心技术应用  细胞的分离 用什么方法分离？  细胞器的分离 如何选择离心机和转头？  核酸、蛋白质的分离  病毒的分离  纳米颗粒的分离 …… 离心方法的选择 • 差速离心法 • 等密度梯度离心法 密度梯度离心法 • 速率区带离心法 差速离心法 • 特点：最常用的方法，但分离纯度不高 • 通过由低至高速反复离心来沉淀悬液中不 同大小的颗粒 • 最大颗粒首先沉淀；随着转速增加，较小 颗粒会随时间沉淀到离心管底部 • 最终上清液只含可溶性物质 • 应用：细菌，细胞的收集及蛋白质沉淀等 差速离心法 肝组织匀浆液 1,000 xg，10分钟 沉淀物 上清液 （细胞核） 3,300 xg，10分钟 沉淀物 上清液 （线粒体） 16,300 xg，20分钟 沉淀物 上清液 （溶酶体） 100,000 xg，30分钟 沉淀物 上清液 （核糖体） 离心参数设定 设置 设置 设置 转速/离心力 离心温度 离心时间 离心时间设定 离心时，估算沉降时间： t ：离心时间（单位：小时） s ：样品的沉降系数 k ：转头k 因子 分离相同样品使用不同转头,离心时间计算公式： 沉降系数 沉降系数 生物颗粒及大分子的沉降系数 K 因子 k 因子：转头离心效率指标