超高压液相色谱.ppt

超高压液相色谱 基本内容 超高压液相色谱（UPLC） 超高压液相色谱（UPLC）是指一种采用小粒径填料色谱柱(2μm)和超高压系统(100MPa)的新型液相色谱技术，可显著改善色谱的分离度和检测灵敏度，同时大大缩短分析周期，特别适用于微量复杂混合物的分离和高通量研究。 组成：进样系统、输液系统、分离系统、检测系统、数据处理系统 原理 UPLC保持了传统HPLC的基本原理，但其分 离效能和分析速度却得到了全面提升，这归功于其独特的小颗粒色谱填料技术。在HPLC的速率理论中，Van Deemter方程可简化为： H=A +B／v + Cv (1) 其中： H—理论塔板高度 v—流动相的平均线速 A、B、C均为常数，其中： A—涡流扩散项系数 B—分子扩散项系数 C—传质阻力项系数 各项均与固定相粒度(dp)相关 如仅考虑dp对H的影响，(1)式可表示为： H=a(dp)+b／v+c(dp) 2v (2) 由（2） H=a(dp)+b／v+c(dp) 2v 可知： 在相同线速度下，填料粒径（dp）越小，理 论塔板高度越小，柱效越高。 小颗粒填料的另一个重要特征是：当增加流量(线速度)时塔板高度没有明显的增大，且维持在一定范围内，即在较大流量范围内保持较高的柱效。因此，可以通过增加流量来加快分离速度，同时维持较高的柱效和良好的分离效果。 特点 与其他液相色谱相比较，UPLC具有以下几个特点： 1、填料粒径小，压力大 UPLC HPLC 粒径 2um 5~10um 压力 100MPa 30~60MPa 2 、检测灵敏度高，重现性好。如采用UPLC／MS ／MS分析大鼠血浆中的混合药物时灵敏度提高了５～１０倍。 3、快速、高效、高分辨的色谱模式 4、进样系统 一般常采用静态切割、压力平衡（采用一强一弱的双溶剂进样）和自动进样三种方式； 5、输液系统 具有耐压性能、各部分之间要有良好的密封； 6、检测系统 使用高频检测器（短时间内出现的许多色谱峰需要更快的数据采集速率相适应； 需要降低样品在检测池内的驻留时间）。 应用 超高压液相色谱（UPLC）是一种新型的色谱分析技术，可以单独使用，也可以和其他色谱如质谱联用（UPLC／MS）。主要应用有： 中药复杂成分的分析，环境监测，农药残留物的检测及蛋谢组学等领域，且具有很好的推广价值。 一、压力高，溶剂的粘度会上升，流量降低（可根　据设定的流量与实际流量进行流量补偿） 二、流动相以较高速度流过固定相时，因摩擦可产生热量，加之流动相和固定相的导热性能较差，可导致温度梯度的出现，造成峰展宽和柱效的下降（流动相预冷）。 三、在超高压下运行的色谱柱可能发生液体喷射和管壁迸裂。（不常发生） 四、分析中药的柱子容易堵柱，而化学药则很少出现这种现象。 * * L/O/G/O * LOGO 概述 原理 特点 应用 4 2 2 3 1 4 5 不足 不足　　 * *