Edit-RCRISPR-Cas9基因加工系统.PDF

Edit-R™ CRISPR-Cas9 基因加工系统 无需克隆的基因编辑 “超级明星” GE 医疗中国 /Dharmacon Dharmacon™ Edit-R™ CRISPR-Cas9 基因加工系统 ——无需克隆的基因编辑 “超级明星” Edit- R ™ CRISPR-Cas9 系统——基因编辑如 对比RNAi 和CRISPR-Cas9 系统——没有更 此简单 好，只有更合适 C RIS PR-Cas 系统是细菌和古细菌在长期演化过程中形成的一 RNA i 和C RIS PR-Cas9 系统分别从RNA 和DNA 水平减少目的 种适应性免疫防御机制，可以识别并沉默入侵的病毒及外源 基因表达，给研究者提供了截然不同的实验方法完成基因功 。近年来，由于基因工程技术的突飞猛进， 能的研究。当一种实验方法不能达到实验目的时，尝试另一 DNA C RIS PR/ Cas 俨然已经成为科学界最炙手可热的热点之一，被广泛应用于 种方法往往可以成功。针对不同的实验需求，您可以选择最 各类体内和体外体系的遗传学改造、转基因模式动物的构建， 适合您实验的方法，Dharmacon 同时提供高品质的RNA i 和 甚至基因治疗领域。该体系其中一个最重要的优势是Cas9 蛋 CRISPR-Cas9 产品供您选择。 白可在多个不同的crRNA 的引导下同时打靶多个基因组位点。 表2. 对比RNAi 和CRISPR-Cas9 系统 表1. 目前主流的CRISPR-Cas9 产品主要有如下几类： 对比RNAi 和CRISPR-Cas9 系统 市面上不同CRISPR-Cas9 系统的区别和特点比较 RNAi CRISPR-Cas9 单组份系统 双组份系统 三组分系统 敲低 敲除 直接合成crRNA 和 RNA 水平 DNA 水平 Cas9 和sgRNA 分别构 tracrRNA ，无需克隆 作用机制 内源的microRNA 细菌的获得性免疫机制 Cas9 和sgRNA 构建 建、不同的质粒，需 表达载体 作用途径 发展而来 在同一质粒内 构建sgRNA 表达载体 Cas9-sgRNA 质粒 Cas9 质粒 Cas9 质粒 效果持续时间 从瞬时到长时程 永久的 tracrRNA sgRNA 质粒 效率 75% 5-50% crRNA 表型 对细胞整体评估 通常需要筛选单克隆 需要构建克隆，测序，需要构建克隆，测序， 无法进行knock-in 操 设计规律 完全理解 稍有起色 质粒纯化步骤，操作 质粒纯化步骤，操作 作。 繁琐，实验周期长。 繁琐，实验周期长。 脱靶机制 完全理解 不完全理解 可构建任意感兴趣 可构建任意感兴趣的 无需构建克隆，无需 非特异性作用 可引起免疫反应 未知 的cr