邻二氮菲吸光光度法测铁的条件实验2.pptVIP

邻二氮菲吸光光度法测铁的条件实验 张帅、葛吉昌、王养茎 时攀 、贺朋军、楚亚龙 一、目的要求 1、掌握邻二氮菲吸光光度法测定铁的条件实验，学会如何选择分光光度计分析的条件。 2、学会邻二氮杂菲分光光度计测定铁的原理和方法。 3、进一步了解分光光度计的构造、性能及使用方法。 二、实验原理 邻二氮菲（简写为phen),是测定铁的一种较好的显色剂.它是测定二价铁的一种高灵敏度的高选择性试剂 在pH 2-9的范围内，Fe2+离子和邻二氮菲反应，生成一种极稳定的橘红色配合物[Fe(phen)3]2+,其lgK稳=21.3（20℃)，其在510nm波长下有最大吸收峰，摩尔吸光系数 ε＝1.1×104。反应式如下： 可见分光光度法测定无机离子,要经过两个过程: 一是显色过程;二是测量过程; 为了使测定结果有较高的灵敏度和准确度,必须选择合适的显色条件和测量条件. 显色反应条件:显色剂用量、酸度、温度、时间及干扰的消除 测量吸光度的条件：波长吸光度范围和参比溶液的选择， 确定显色反应的最佳实验条件，也就可以在一定程度上保证了实验的准确度和精密度。 我们的条件实验通常采用单因素实验法。其原理是在几个实验条件中，改变其中一个条件的值，固定其它的条件，然后测定相应的吸光度值，再从中找出符合实验要求的条件。 三、仪器和试剂 1．醋酸钠：1mol·L-1； 2．氢氧化钠：1 mol·L-1； 3．盐酸羟胺：100 g·L-1；(用时配置) 4．邻二氮菲溶液(1.5 g·L-1)： 5．100μg·ml-1铁标准溶液 准确称取0.864g分析纯NH4FE(SO4)2·12H2O,置于一烧杯中，以30ml2mol·l-1HCl溶液溶解后转入1000ml容量瓶中，以水稀释至刻度，摇匀。10μg·ml-1的铁标准溶液 由100μg·ml-1的铁溶液稀释10倍即可 四、实验步骤 1.吸收曲线的绘制：用吸量管准确吸取10 ug·mL-1铁标准溶液5 mL，置于50mL容量瓶中。加入100 g·L-1盐酸羟胺溶液1mL，摇匀后加入1.5 g·L-1邻二氮菲溶液2mL和1mol·L-1醋酸钠溶液5mL ，以水稀释至刻度，摇匀。放置十分钟后。在分光光度计上，用1cm比色皿，以水为参比溶液，波长从570nm-430nm为止，每隔10或20nm测定一次吸光度（其中从530至490nm，每隔10nm测一次）然后以波长为横坐标，吸光度为纵坐标绘制出吸收曲线，从吸收曲线上确定该测定的波适宜波长，既是最大吸收波长。 2．邻二氮菲与铁的配合物的稳定性：用吸量管准确吸取10 ug·mL-1铁标准溶液5 mL，置于50mL容量瓶中。加入100 g·L-1盐酸羟胺溶液1mL，摇匀后加入1.5 g·L-1邻二氮菲溶液2mL和1mol·L-1醋酸钠溶液5mL ，以水稀释至刻度，摇匀。放置十分钟后。在分光光度计上，用1cm比色皿，以水为参比溶液，在最大吸收波长510 nm处，从加入显色剂后立即测定一次吸光度，经15min，30 min，45min，60min后，各测一次吸光度。以时间(t)为横坐标，吸光度(A)为纵坐标，绘制A—t曲线，从曲线上判断配合物稳定的情况。 3．显色剂用量的影响： 取50mL容量瓶6个，各加入10 ug·mL-1铁标准溶液5ml，1ml 100 g·L-1盐酸羟胺溶液，摇匀.再分别加入邻二氮菲溶液0，0.5，1.0，2.0，3.0和4.0mL ,再各加入醋酸钠5mL. 以水稀释至刻度，摇匀。在分光光度计上，用适宜波长(510nm)，1cm比色皿，以水为参比测定不同用量显色剂溶液的吸光度。然后以邻二氮菲试剂加人毫升数为横坐标，吸光度为纵坐标、绘制A—v曲线，由曲线上确定显色剂最佳加入量。 4.溶液酸度对配合物的影响： 准确吸取100μg·ml-1铁标准液5ml于100ml容量瓶中，加入5ml 2mol/LHCl溶液和10ml100g/L盐酸羟胺溶液，经2min后加入1g/L邻二氮杂菲30ml，以水稀释至刻度，摇匀，备用。取25ml容量瓶7只，编号，用吸量管分别准确吸取上述溶液5ml于各容量瓶里。在滴定管中装0.4mol/L NaOH溶液，然后分别在7只容量瓶中加入0.4mol/LNaOH溶液0.0ml，1.0ml,1.5ml,2.0ml,3.0ml,4.0ml及5.0ml,以水稀释至刻度，摇匀，使各溶液的pH从≤2开始逐步增加至12以上。放置10min，在分光光度计上用最大吸收波长（510nm） 2cm比色皿，以水参比测定吸光度A。用精密pH试纸测定各比色皿中溶液的pH。最后以pH为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制A-pH曲线。从曲线上找出适宜的pH范围。 B、铁含量的测定 1.标准曲线的测绘：取25ml容量瓶6只，编号。分别取10μg·ml-