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第9章 常见植物的脱毒与快速繁殖技术 本章主要内容(4学时) 蔬菜的脱毒与快繁 果树的脱毒与快繁 花卉植物的脱毒与快繁 农作物的脱毒与快繁 药用植物的试管快繁 树木的脱毒与快繁 本章教学目的与要求 (1)掌握马铃薯的生物学习性，掌握马铃薯脱毒培养的过程以及马铃薯脱毒苗的鉴定方法；掌握番茄的生物学特性及快速繁殖方法； (2)掌握苹果的脱 毒方法与快繁技术；掌握葡萄的脱毒与快技术；掌握草莓的脱 毒与快繁技术； (3)掌握兰花、香石竹、菊花、非洲菊、矮牵牛、百合等花卉的生物学特性，组培快速繁殖方法及自然繁殖法； (4)掌握甘薯的生物学特性，脱毒与快繁的方法及技术； (5)掌握芦荟、桔梗等药用植物的快繁技术； (6)掌握毛白杨、河北杨等绿化苗木的快繁技术。 第一节 蔬菜的脱毒与快繁 一、马铃薯的组织培养 马铃薯病毒的种类 （一）、马铃薯特性和生物学习性 （二）、马铃薯脱毒技术 1．脱毒种薯生产程序 2．茎尖培养脱毒 （2） 继代和生根 (3) 驯化 （三）、马铃薯无病毒苗的鉴定材料 （四）、马铃薯无病毒株的繁殖 二、番茄的组织培养 （二）、番茄的组织培养 （三）、番茄的胚培养 第二节 果树的脱毒与快繁 一、苹果的脱毒与快繁 （二）、脱毒技术 1、病毒种类：苹果褪绿叶斑病毒、苹果茎痘病毒和苹果茎沟病毒等 。 2、微尖嫁接脱毒：砧木：去顶的离体培养幼苗，接穗：试管培养的无毒新稍；嫁接后培养生叶，移栽即可。 3、热处理脱毒：把植株置于38 ℃下25-50天。 4、茎尖培养脱毒：把0.1-0.3mm的茎尖离体培养。 5、脱毒苗的鉴定：抗血清法，电子 显微镜法，ELISA法、指示植物法。 （三）、苹果茎尖脱毒快繁技术 1、材料与消毒：带芽或茎尖的茎段；常规消毒，用无菌水洗3～5次 ；切茎尖约0.1～0.5mm。 2、芽的诱导：MS或LS+BA2+300～500CH或LH+3%蔗糖的培养基上，诱导芽的分化。 3、继代增殖培养：MS+BA0.5～1+CH300 培养基上增殖。 4、生根培养：1/2MS或 White，Nitsh附加IAA1、IBA0.2和GA33 等。 （四）苹果花粉培养 1、选材与预处理：选取中心花蕾吐红，周围花蕾明显增大，但花序尚未分离的花蕾，置于冰箱中1-3℃预处理。 2、消毒：70%的酒精浸约0.5min，再在10%漂白粉上清夜中浸15～20min。 3、胚状体诱导：接种到MS+2,4-D0.4 + KT0.2 + IAA4 + 3～8%蔗糖培养基上，25～30℃下培养。 4、生根：同茎尖脱毒中所用方法。 （五）胚培养 1、取材消毒：取授粉30～50d内的幼果，用70%酒精擦拭。取出种子，剥出幼胚或成熟胚。 2、启动培养：接种在BA0.25+IAA0.5的1/2MS培养基上。培养条件为25～30℃和1500～2000lx光照14h。 3、分化增殖：移植到加有BA0.5～1.0和CH300的1/2MS培养基上 ，在光下培养条件同上。 4、生根培养：同茎尖培养。 二、葡萄的脱毒与快繁 （一）、形态特征和生物学习性 葡萄属落叶木质藤本植物，葡萄地上部分的茎细。节上具有卷须，可向上攀援。叶近圆型或卵型，3～5裂。 葡萄原产于温带地区，不太抗寒。葡萄的根系抗寒力很弱，在－5～－7℃时即受冻。 （二）、葡萄的组织培养 1、选材接种：从生长旺盛的葡萄新梢顶端取1～2㎝的茎尖。消毒。分离出约2㎜长的茎尖，接种到培养基上。 2、培养基：MS培养基（无机盐减半为好），再添加BA1～2，NAA0.01，LH100，蔗糖2%，琼脂0.6%，而B5培养基愈伤组织化严重，茎尖生长不好。 3、苗分化：BA0.5，同时添加GA30.2，黑暗处理可促进幼茎的伸成，提高成苗率。 4、根分化：将苗转入MS+IAA0.4+NAA0.05培养基中进行生根。 （三）、葡萄无病毒苗的培养? 三、草莓的脱毒与快繁 （一）、形态特征和生物习性 草莓（Fragaria）属多年生草本植物，植株矮小，呈半平卧丛状生长，基生三出复叶。果实为聚合瘦果生于花托上。 草莓喜光但又较耐阴，要求肥沃、疏松、透水、通气的中性微酸性或微碱性土壤。 （二）、草莓脱毒苗的培养 1、热处理脱毒 将草莓植株在40～41℃温度下处理4～6周。 2、微茎尖脱毒 （1）、初代培养 ：取草莓顶芽，用自来水流水冲洗2～4h，然后剥去外层叶片，消毒， 切取0.2mm的茎尖。接入MS + BA0.25 + NAA0.25培养基中。培养条件为22～25℃，日照16～18h光强3000lx。 （二）、草莓脱毒苗的培养 第三节 花卉植物的脱毒与快繁 一、兰花的脱毒与快繁 兰花系兰科(Orchidaceae