第七章微生物遗传变异与育种.pptVIP

●夹层培养法 （4）鉴定缺陷型(生长谱法) 1）制备基本 培养基； 2）加充分洗 涤菌悬液； 3）加待测营 养物； 4）观察生长。 §.2 基因突变和诱变育种 一、基因突变 ●野生型菌株：从自然界分离获得的菌株， 称之为~。 ●基本培养基：满足野生型菌株生长最低营 养要求的合成培养基。 （一）突变类型 ●营养缺陷型：野生型菌株由于突变而丧失 了 某种营养合成能力，而无法在基本培 养基上生长的变异类型。 表示： 基 因：his+，his - ； 表 型：His + ，His - ●抗性突变型：野生型菌株由于突变而产 了对某些化学药物或致死物理因子抗性 变异类型。 表示： 基 因： strr、strs； tetr、tets； 表 型：Str r ， Str s ●条件致死突变型：某些菌株或病毒经基因 突变后，在某种条件可生长并实现表型，而 在另一条件却无法生长繁殖的突变类型。 ●温度敏感突变株 ●形态突变株 ●抗原突变株 ●产量突变株 ●突变株的表型 ----选择性突变株：营养缺陷型、抗性 突变型、条件致死突变型 ----非选择突变株：形态、抗原、产量 突变型 （二）突变率及其捡出 ●突变率：某一细胞在每一世代中发生突 变的几率。常用单位群体中每一世代产 生的突变株的数目来表示。 ●突变率的计算及突变株的捡出 ----营养缺陷型 ----抗药性突变 ----回复突变 （三）基因突变的自发性与不对称性 ●突变的自发性：基因可自发产生突变。 （辐射、自身有害物质、碱基配对错误） ●突变的不对应性：突变性状与引起突变 的原因无直接对应关系。 ●平板影印培养试验 （四）基因突变及其机制 1、点突变：单个或少数几个碱基的改变。 1）碱基置换 ---转换 ---颠换 错义突变 无义突变 同义突变 ●直接引起置换： 亚硝酸、亚硝基胍、羟胺、烷化剂 ●间接引起置换： 碱基类似物 2）移码突变 DNA序列中插入或缺失少数核苷酸，从而使该处后面遗传密码的阅读框架发生改变的突变。 2）染色体畸变 DNA分子的大段损伤，包括缺失、重复、 插入、易位（转座）和倒拉等。 ●转座：DNA分子通过非同源重组方式， 从染色体的某一部位转移到另一部位的 现象。 ●转座因子：凡具有转座作用的DNA序列 均称之~。 特点： ---转座作用 ---末端重复序列 ---转座酶基因 ●转座因子类型 ●转座机理 ●转座子的遗传效应 1）插入突变 2）DNA重排 （复制型转座） （五）紫外线对DNA的损伤及其修复 1．损伤的机理： 形成胸腺嘧啶二聚体 2、修复作用 1）光复活作用 光解酶-二聚体复合物为光激活 2.暗修复作用（dark repair）： 3、重组修复 4、SOS修复 ?二、??? 突变与育种 （一）自发突变与育种(定向培育） （二）诱变育种 1、基本原则（应考虑的问题） 1） 诱变剂的选择 ●诱变剂效果的测定---艾姆斯试验 （同时可用于三致物质的检测） 2）出发菌株 3）诱变菌株的状态 ----处理单胞（孢）悬液 ----选择单倍体或单核细胞 4）剂量：低剂量；表示方法 5）提高检出效率 ----利用形态特征 ----鉴别培养基 ●利用鉴别培养基检出突变株 ----蛋白酶高活性菌株的检出 （酪蛋白为N源，加HgCl2观察透明圈） ----淀粉酶高活性菌株的检出 （淀粉为C源，加I2液观察透明圈） ----有机酸高产菌株的检出 （培养基加CaCO3观察透明圈） 6）设计高效的 筛选方案 ----初筛（数量、 定性） ----复筛（质量、 定量） 7）创新性的 筛选方法 2、营缺型的筛选 （1）三