甲鱼的防腐保鲜.doc

甲鱼的防腐保鲜 二．防腐剂的选择：乳酸链球菌素是一种安全、高效的天然防腐剂，极易被人体中蛋白酶及胰蛋白酶分解为小分子氨基酸和小分子肽，不会改变肠道中正常的菌群，且不产生抗药性，半致死剂量与实验相近，使用安全性高。能够抑制大部分革兰氏阳性菌及芽孢和孢子的生长与繁殖。由于其对耐热性菌体有良好的杀菌效果，在这里应用是合适的。 山梨酸钾：作为新型的食品添加剂具有高效、无毒、稳定、易溶解等优点，在肉制品的生产中应用极为广泛。山梨酸钾能有效的抑制细菌、霉菌和酵母菌等的生长，对革兰氏阴性菌有良好的抑制效果，与Nisin复配使用可以扩大抑菌范围，且效果显著，不会对食品的风味造成不良影响，被人体摄入后可参与新陈代谢，最终被氧化生成二氧化碳和水，对人体无害。 三检测指标1 硫代巴比妥酸反应产物（TBARS）值的测定畜禽产品的氧化酸败主要是脂肪中不饱和脂肪酸如亚油酸、、、、。MDA）能与硫代巴比妥酸（TBA）反应，生成红色复合物，此复合物在 532 nm 处有最大吸收峰，吸收强度和生成的复合物在一定范围内呈线性关系。1、2、3、4、5、6、7mL 1.1.3.3- 四氧乙基丙烷置于50mL 离心管中，然后分别加入 9、8、7、6、5、4、3mL 10mL 溶液，再分别加入 20%的三氯乙酸 5mL、0.2%5mL 和0.5%没食子酸丙酯乙醇溶液1mL，充分摇匀，再加入5mLTBA溶液，混匀后置于沸水浴中溶解 40 min，放入冰水浴中冷却 30 min，然后再加入10mL正丁醇，充分摇匀，在4 800 r/min 条件下离心6 min，取上清液分别在532 nm和600nm下测定其吸光值。。10mL，分别加入 20%的三氯乙酸 5mL、0.2%乙二胺四乙酸二钠溶液5mL和0.5%没食子酸丙酯乙醇溶液1mL，充分摇匀，再加入 5mL TBA 溶液，混匀后置于沸水浴中 40 min 后，放入冰水浴中冷却 30 min，然后再加入 10mL 正丁醇，充分摇匀，在4800 r/min 条件下离心 6 min，取上清液测定其吸光值。。TBARS）值的计算公式：TBARS值（mg/kg）= A532- A600×K m×W 其中：A 为吸光度；K 为标准曲线的斜率；；m 为取样质量（ g ）；W 为油的质量分数。g（mL）检样中形成的微生物菌落总数。2 设备和材料除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下：2.1 恒温培养箱：36℃±1℃，30℃±1℃。2.2 冰箱：2℃ ～5℃ 。2.3 恒温水浴箱：46±1℃ 。2.4 天平：感量为0.1g。3.5 均质器。2.6 振荡器。2.7 无菌吸管：1mL（具 0.01mL刻度）、10mL（具 0.1mL刻度）或微量移液器及吸头。2.8 无菌锥形瓶：容量250mL、500mL。2.9 无菌培养皿：直径90mm。2.10 pH计或pH比色管或精密pH试纸。2.11 放大镜或菌落计数器。3 培养基和试剂3.1 平板计数琼脂培养基：见附录 A 中 A.1。3.2 磷酸盐缓冲液：见附录 A 中 A.2。4.3 无菌生理盐水：见附录 A 中 A.3。5 检验程序菌落总数的检验程序见图1。     6操作步骤 6.1样品的稀释6.1.1 固体和半固体样品：称取25g样品置盛有225mL磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌均质杯内，8000r/min～10000 r/min 均质 1 min～2 min，或放入盛有225mL稀释液的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打1 min～2 min,制成1:10的样品匀液。6.1.2 液体样品：以无菌吸管吸取25mL 样品置盛有225mL磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌锥形瓶（瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠）中,充分混匀，制成 1:10 的样品匀液。 6.1.3 用1mL无菌吸管或微量移液器吸取1:10样品匀液1mL，沿管壁缓慢注于盛有9mL 稀释液的无菌试管中（注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面）,振摇试管或换用1支无菌吸管反复吹打使其混合均匀,制成1:100 的样品匀液。6.1.4 按 6.1.3 操作程序，制备 10 倍系列稀释样品匀液。每递增稀释一次，换用1次1mL无菌吸管或吸头。6.1.5 根据对样品污染状况的估计，选择2个～3个适宜稀释度的样品匀（液体样品可包括原液），在进行10倍递增稀释时,吸取 1mL样品匀液于无菌平皿内，每个稀释度做两个平皿。同时，