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白膜法制备血小板细节要点
目 录 白膜法制备血小板条件 分离白膜 分离血小板 1.白膜法制备血小板条件 献血员条件:随机 无要求。 运输条件:18-22℃ 血袋要求及品牌:四联袋 血小板专用袋(有透气功能) 离心机要求:大型低温离心机(贺利氏 6000i) 时间要求: 采血2小时内开始制作,6小时内完成制作 存储条件:20℃~24℃ 震荡保存 72小时 2.分离白膜 2.1 装杯离心 ⑴ 对全血进行血小板计数,目的是计算出该全血中血小板总量。 ⑵ 装杯时需要将血袋竖直塞满离心杯,防止未竖直而出 现红细胞挂壁现象。建议多垫水袋或者空袋子。装完 后将塞口红细胞敲下去。放入离心机离心. 2.2离心完成后上机操作 ⑴将离心后好的血液往外拿时一定要注意轻拿轻放,防止白膜层严重晃荡。 ⑵上机挂袋 将全血袋挂在称重一位置挂杆上,需要注意的是血袋不能紧贴住设备前壁,这样更利于分离白膜层。 2.3 程序控制 第一步分浆步骤:利用光感控制,红细胞液面上升至M1 光感位置停止,分浆步骤结束。 第二步分离白膜步骤:利用重量控制,白膜重量达到 44g,分离白膜步骤结束。 第三步排气步骤: 利用时间控制,目的是将血浆袋内 的空气排除至全血袋内。 第四步回浆至白膜袋:利用重量控制, 白膜重量增加 39g血浆,回浆步骤结束。 以上为整个分离白膜步骤,白膜量可以根据实际情况进 行调试,以达到最佳效果,实现白膜定量。 2.4制备完成后对白膜的处理 将白膜袋静置在22℃左右室温条件下一小时。目的是使白膜块解聚。解聚完成后装杯进行第二次离心。 2.5 离心参数的调整方法 ⑴肉眼观察 离心后的血液从离心机取出来后,首先对离心效果有一个大概的判断,先观察白膜层:如果白膜层聚集太厚,说明离心力过高;反则离心力过轻。如图: ⑵对血浆进行血小板计数 对血浆进行血小板计数,如果血浆中血小板总量多则说明离心力轻;根据以上两个判断就可以正确调整白膜离心参数。 3.分离血小板 3.1装杯离心 因为白膜量非常少,所以装杯的时候一定要注意需要用硬东西将白膜竖起来离心,如图: 同样道理,将导管口红细胞敲下去,然后进行离心。 3.2离心完成后上机操作 ⑴将离心后好的白膜往出拿时一定要注意轻拿轻放,防止红细胞层晃荡。稍微晃荡起来的可以挂在设备上沉淀一会,待红细胞层清晰时再开始执行程序。如图: ⑵挂导管时尽量使A卡钳导管留的长点,这样血小板袋离A卡钳距离缩短。因为程序控制是使用的卡钳光感控制,这样可以尽最大量的分离血小板。 3.3 程序控制 分离血小板步骤采用的是光感和重量联 合控制: 程序中设定两个控制条件:血小板的重量达到60g;红细胞上升到E1光感位置(A卡钳光感)。两个条件有一个满足时,程序结束。并且程序中都设置流速调节控制,这样做既保证了血小板重量的准确,同时控制了血小板中红细胞的混入量。 3.4 离心参数调整 ⑴肉眼观察 离心后的血液从离心机取出来后,首先对离心效果有一个大概的判断,先观察分层:如果能看出来轻微白膜层,说明离心力有点重或者是离心时间长,如果发现血小板中悬浮有红细胞,则证明离心力轻或者离心时间过短了。 ⑵对残留红细胞进行血小板计数 对残留的红细胞进行血小板计数,如果红细胞中血小板总量多,则证明离心力大或者离心时间长; ⑶对成品血小板进行计数 对成品血小板计数,血小板中红细胞的量超标的话说明第二次离心力过轻。 结合以上三种判断方法就可以正确调整第二次离心参数。 3.4 血小板得率的计算 成品血小板总量=成品血小板计数×成品血小板体积; 全血血小板总量=全血血小板计数×全血体积; 血小板得率=(成品血小板计数×成品血小板体积)÷(全血血小板计数×全血体积) 血小板中红细胞总量=血小板中红细胞计数×血小板体积 3.5合格血小板要求 血小板容量为25-30ml/200ml ; 50-60ml/400ml. 血小板含量≥2.0X1010/200ml ;4.0X1010/400ml. 红细胞混入量≤ 1.0X109/200ml ; 2.0X109/400ml
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