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细胞生物学实验 * 课程介绍 * 细胞生物学是研究细胞基本生命活动规律的科学,本课程的目的和任务在于通过实验加深和巩固学生对基本知识和基础理论的理解,初步掌握细胞生物学实验的一些基本操作和基本技能,培养学生分析问题、解决问题的能力,培养科学务实的精神。 实验内容 * 序号 实验名称 学时 1 细胞膜的渗透性 2 2 线粒体的活体染色与观察 2 3 细胞内酸性蛋白和碱性蛋白的显示 2 4 细胞核的分离与鉴定 3 5 细胞融合 3 6 人类体细胞染色体组型分析 3 7 动物染色体标本的制备与观察 3 实验一、细胞膜的渗透性 * 了解溶血现象及其发生机制; 了解细胞膜的渗透性及各类物质进入 细胞的速度。 一、实验目的 * 由于细胞膜对各种溶质的透性不同,将红细胞放入数种等渗液中后,有的溶质可以渗入,有的溶质不能渗入,渗入的物质能够提高红细胞的渗透压,所以促使水分进入细胞,引起溶血。由于溶质渗入细胞速度各不相同,因此溶血时间也不相同。因此,可以利用溶血时间粗略的判断物质穿膜的速度和时间。 二、实验原理 * 1、实验器材 50mL烧杯、10mL移液管、滴管、试管、试管架 2、试剂 生理盐水、蒸馏水、0.17 mol/L 氯化钠、0.17mol/L氯化铵、0.17mpl/L硝酸钠、0.12mol/L草酸铵、0.32mol/L葡萄糖、0.32mol/L甘油、0.32mol/L乙醇、 3、实验材料 鸡血液 三、实验材料 * 1、鸡血细胞悬液的制备 取将35ml鸡血倒入350nl生理盐水中,配成一种不透明的红色鸡血细胞悬浮液 2、溶血观察 往试管中加入10ml蒸馏水,再加入1ml鸡血细胞悬液,摇动混匀,溶液有浑浊迅速变为澄清透明,即红细胞膜发生破裂形成溶血。 四、实验步骤 * 3、鸡血细胞膜渗透性观察 逐一量取6种等渗溶液各10ml,倒入试管中,再逐一加入1ml鸡血细胞悬液,轻轻摇动混匀,注意发生什么变化?溶液是否逐渐澄清透明?若是,记下时间,即自加入鸡血细胞悬液到溶液变成澄清透明所经历的时间。如果10min溶液仍然保持浑浊,则为不溶血。 四、实验步骤 * 1、试管中有红细胞和测试溶液时,不能用力摇动,避免人为因素造成的红细胞破裂 五、注意事项 * 记录观察到的实验现象,并对实验结果进行分析和比较 六、实验结果 * 试管编号 是否溶血 时间 结果分析 0、 5ml蒸馏水+ 1ml 稀释鸡血悬液 1、5ml 氯化钠+1ml稀释鸡血悬液 2、5ml 氯化铵+1ml稀释鸡血悬液 3、5ml 硫酸钠+1ml稀释鸡血悬液 4、5ml 硝酸钠+1ml稀释鸡血悬液 5、5ml 草酸铵+1ml稀释鸡血悬液 6、5ml 葡萄糖+1ml稀释鸡血悬液 7、5ml 甘油+1ml稀释鸡血悬液 8、5ml 乙醇+1ml稀释鸡血悬液 1.生理盐水:氯化钠 0.9g ,蒸馏水 100.0ml 2.0.17 mol/L 氯化钠溶液:氯化钠 4.976g,蒸馏水 500ml 3.0.12mol/L硫酸钠溶液:硫酸钠 8.5g,蒸馏水 500ml 4.0.17mol/L 硝酸钠溶液:硝酸钠 7.224g,蒸馏水 500ml 5.0.17mol/L 氯化铵溶液:氯化铵 4.574g,蒸馏水 500ml 6.0.12mol/L草酸铵溶液: 草酸铵 4.62g,蒸馏水 500ml 7.0.32mol/L乙醇溶液: 无水乙醇 9.33ml,蒸馏水 500ml 8.0.32mol/L甘油溶液: 甘油(1.26g/ml) 11.7ml,蒸馏水500ml 9.0.32mol/L 葡萄糖溶液 葡萄糖 28.83g,蒸馏水 500ml 试剂配制 *
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