第11章 抗生素类药物的分析.ppt

第十一章 抗生素类药物的分析 （Analysis of Antibiotics Drugs） 第一节 概 述 二、抗生素药物的质量分析：鉴别、检查、含量（效价） 方　法：　理化方法、生物学方法 （一）??鉴别试验 1．? 官能团的显色反应 2．? 光谱法：　UV、IR 3．? 色谱法：　TLC、HPLC 4．生物学法：　检查抗生素灭活前后的抑菌能力，将其与对照品比较进行鉴别。 （二）检　查 　检查项目包括：　1）影响产品稳定性的指标；2）控制有机或无机杂质的指标：3 ） 与临床安全性密切相关的指标；4）其他指标 （三）含量测定或效价测定 1 、微生物检定法 原理：以抗生素对微生物的杀伤或抑制程度为指标来衡量其效价。 特点：　1）灵敏度高；2）测定原理与临床应用的要求一致，更能体现其医疗价值；3）适用范围广（纯品、粗制品、混合品等）；4）操作烦琐、误差大，表现出逐渐被理化方法所代替的趋势。 2 、理化方法：　各国药典主要采用HPLC法测定提纯的产品以及药学结构已明确的抗生素。 3 、抗生素活性表示方法： 以效价单位即“单位(u)”或“微克(?g）”表示，其效价单位的基准对于各种抗生素的规定各异。 例：青霉素钠1mg=1670u, 庆在霉素1mg=590u 三、抗生素的分类 在工业生产和质量控制分析中，常用化学结构进行分类，可分为： 　1） β-内酰胺环（青霉素、头孢菌素类）； 　2） 氨基糖苷类（链霉素、庆大霉素、卡那霉素等）； 　3） 四环素类（四环素、金霉素、土霉素等）； 　4） 大环内酯类（红霉素、麦迪霉素、螺旋霉素等）； 　5） 多烯大环类（制霉菌素、两性霉素B等）； 　6） 多肽类（多粘菌素、放线菌素等）； 　7） 苯烃胺类（氯霉素等）； 　8） 蒽环类（阿霉素、紫红霉素等）。 　9）　其它抗生素 第二节 ?—内酰胺类抗生素 主要包括：　青霉素族（PC）、头孢菌素族（CEP）两大类 一、化学结构与性质 1、化学结构 化学结构的特点 1）分子结构由母核与侧链（RCO-)构成 母　核：　由A环（?—内酰胺环）与B环（氢化噻唑环或氢化噻嗪环）骈合而成。 青霉素族（PC）的母核： 6-氨基青霉烷酸（i.e. 6-APA） 头孢菌素（CEP）族的母核： 7-氨基头孢菌烷酸(i.e. 7-ACA） 2）含有一个游离羧基和一个酰胺侧链。 3）具有手性碳原子：　PC有三个(C3、C5、C6)；CEP为两个(C6、C7)。 2、 性 质 （1）酸性与溶解度；　　　游离羧基有较强的酸性、易于成盐。碱金属盐易溶于水，青霉素有机碱盐难溶于水，易溶于有机溶剂。 （2）旋光性；　　青霉素、头孢菌素类分子中均含有手性碳原子，它们均具有旋光性，据此可以进行定性定量分析。 （3）紫外吸收光谱 青霉素类　　　分子中母核无离域共轭体系，侧链R中若存在紫外活性的共轭系统，则青霉素即表现出特征光谱。 例：青霉素钾（钠），R为苄基，其水溶液在264nm处存在较强吸收。 头孢菌素类　　分子的母核中存在O=C-N-C=C紫外光谱活性基困，故该类抗菌素均表现为光谱活性。 例：头孢氨苄，水溶液在262nm处有紫外吸收。 （4）?—内酰胺环的不稳定性 ?—内酰胺环是该类药物结构最不稳定的部分，其稳定性与含水量和纯度相关。 在水溶液中：　　 ?—内酰胺环易受亲核或亲电试剂进攻（例：酸、碱、青霉素酶、金属离子等），使该环分解或发生分子重排，从而失去抗菌活性。 在干燥纯净的固体中：　　它们却表现出较强的稳定性，这正是该类制剂保存的有利因素。 两类的比较：　　在相同条件下，头孢菌素类将表现出比青霉素类较强的稳定性。但酸、碱、?—内酰胺酶、胺类均能加速头孢菌素族分子的降解。 二、鉴别试验 （一）呈色反应 1．羟肟酸铁反应 原　理　　青霉素或头孢菌素在碱性介质中，分子中的酰胺基与盐酸羟胺作用产生羟肟酸，该产物再与酸性硫酸铁胺的Fe3+络合产生红色络合物而呈色。 例：头孢哌酮呈红棕色，其反应式为 2．类似肽键的反应（茚三酮反应）：　　有些侧链取代基R－CONH－结构中存在?－氨基酸结构（如R－为氨苄基的氨苄西林、头孢氨苄）的药物可发生茚三酮反应。 3．其他呈色反应： 硫酸—硝酸反应：　头孢菌素能与硫酸—硝酸发生呈色反应。如：头孢噻吩钠呈红棕色，头孢氨苄呈黄色。 硫酸—甲醛呈色反应：　先后分别在冷和热硫酸－甲醛中观察药物溶液的颜色变化（见下表）。 （二）各种盐的反应 1．钾盐、钠盐的火焰反应 2．重氮化－偶合反应：　　在青霉素类及其盐中，若能产生芳胺或芳烃胺，则能利用重氮化－偶合反应生成偶氮染料红