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血清胆固醇的测定(氧化酶法)Assays for Serum Cholesterol 一、原理 二、测定方法 三、参考值 四、临床意义 五、方法学评价 六、注意事项 七、小结 一、原理 血清中总胆固醇(TC)包括游离胆固醇(FC)和胆固醇酯(CE)两部分。血清中胆固醇酯可被胆固醇酯酶水解为游离胆固醇和游离脂肪酸(FFA),胆固醇在胆固醇氧化酶的氧化作用下生成胆甾烯酮和过氧化氢,过氧化氢在4-氨基安替比林和酚存在时,经过氧化物酶催化,反应生成苯醌亚胺非那腙的红色醌类化合物。 胆固醇酯+H2O 胆固醇+脂肪酸 (CE胆固醇酯酶) 胆固醇+O2 4-胆甾+3-烯酮+H2O2 (COD:胆固醇氧化酶) H2O2+4-AAP+酚 H2O+醌亚胺(红色醌类化合物 ) (4-AAP: 4-氨基氨替比林) (POD:过氧化物酶) 红色醌类化合物生成量与样品中胆固醇含量成正比,与经过同样处理的胆固醇校准液进行比较,即可计算出样品中胆固醇的含量。 二、测定方法 1、试剂 R1:胆固醇酯酶(CE) ≥0.4KU/L 胆固醇氧化酶(COD) ≥0.2KU/L 过氧化物酶(POD) ≥5.0KU/L 4-氨基安替比林(4-APP) 0.5mmol/L R2: 酚 20.0mmol/L 胆酸钠 2.0mmol/L 二、测定方法2. 加样 各管充分混匀置37水浴10分钟后,室温冷却测定 试剂蒸 样品管(U) 标准管(S) 空白管 (B) 血 清(ml) 0.02 — — 标 准液(ml) — 0.02 — 蒸 馏水(ml) — — 0.02 工作试剂(ml) 2.00 2.00 2.00 3. 分光光度计测定方法:波长505nm,以空白管调零,测定标准管和样品管吸光度值,按公式计算测定结果。 计算公式:Glu含量(mmol/L)= ×Cs 其中:Cs=5.22 mmol/L 三、参考值: 正常:﹤5.17mmol/L 轻度增高:5.17~6.47mmol/L 四、临床意义: 1. 血清胆固醇升高:动脉粥样硬化、肾病综合征、肝细胞性黄疸、阻塞性黄疸及重症糖尿病等。 血清总胆固醇是是指血液中所有脂蛋白所含胆固醇之总和。总胆固醇包括游离胆固醇和胆固醇酯,肝脏是合成和贮存的主要器官。胆固醇是合成肾上腺皮质激素、性激素、胆汁酸及维生素D等生理活性物质的重要原料,也是构成细胞膜的主要成分,其血清浓度可作为脂代谢的指标。指临床上将血总胆固醇增高称为高胆固醇血症。 血清总胆固醇水平分为三级:合适范围5.72mmol/L(220mg/dl)。边缘升高5.23-5.69mmol/L(201-219mg/dl);过高值5.72mmol/L(220mg/dl)。 血清总胆固醇水平增高是导致冠心病的独立危险因素。血清总胆固醇越高,发生动脉粥样硬化的风险越大,时间也越早。血清总胆固醇每降低1%,发生冠心病的危险性可减少2%。但另一方面,血清总胆固醇降到多低合适?目前认为,将 血清总胆固醇保持在2.1-5.2mmol/L(90-200mg/dl)范围内较为合适。对已有动脉粥样硬化或冠心病者,应将胆固醇降至180mg/dl以下。 2.血清胆固醇降低:恶性贫
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