第6章 a固相萃取-高效液相色谱法同时检测畜禽粪便中14种兽药抗生素.pdf

第40卷 分析化学(FENXIHUAXUE)研究报告 第2期 2012年2月 ChineseJournalof 213～217 AnalyticalChemistry DOiI 10．3724／SP．J．1096．2012．010619 固相萃取一高效液相色谱法同时检测畜禽粪便中14种兽药抗生素 李艳霞+ 李帷2 张雪莲1 杨明1 (北京师范大学环境学院水环境模拟国家重点实验室，北京100875) z(环境保护部核与辐射安全中心，北京100082) 摘要研究并优化了同时分析畜禽粪便中14种抗生素(四环素，磺胺，氟喹诺酮和大环内酯类)的加速溶剂 2．6)作为流动 萃取参数、困相富集净化程序、以及高效液相色谱分离和检测条件。结果表明。以l％乙酸(pH 相。在270姗的检测波长下，14种抗生素能达到基线分离。3倍信噪比下。四环素、磺胺、氟喹诺酮和大环内 酯类抗生素的检出限分别为35～90肛g／kg,12～28 I．tg／kg,9～17¨g／kg及19pg／kg。加标浓度在l和10¨g／g 时，畜禽粪便样品经过500,6甲醇的柠檬酸盐缓冲溶液提取，HLB固相萃取柱富集净化后，四环素、磺胺、氟喹 诺酮和大环内酯类抗生素的回收率分别达到了58％～75％和66％～83％，74％～93％和91％～101％，74％～ 13．2％．6．1％～12．5％和8．3％～14．6％，IO．6％和12．3％。采用此方法对辽宁省部分规模化养殖场的猪粪、牛粪 和鸡粪样品进行了检测。4类抗生紊都有检出，浓度范围分别为0．75～22．34 mg／kg,0．10～1．71mg／kg,O．38～ 4．46 mg／kg和0．23～0．35mg／kg。 关键词畜禽粪便；抗生素；固相萃取；高效液相色谱 1 引 言 从20世纪50年代起，抗生素在畜禽养殖业中开始被普遍使用11I，其主要用途包括动物疾病治疗、动 物生长调节剂以及提高饲料利用效率等旺1。抗生素作为药物和非药物对畜禽养殖业的发展起到重要作 用，在很多国家的使用量也在不断增加，以美国为例，集约化养殖场抗生素的使用量约占其抗生素年生 产量的80％Pl。大多数抗生素在动物体内吸收性差，30％～90％会以原形药物形式排出体外【4一。因 此，大量抗生素将随畜禽粪便进入环境，对地表水、农田土壤，甚至地下水造成污染17．81。 不同类型的养殖场在动物生长的不同周期使用的抗生素种类不同，因此，对粪便中可能残留的多种 抗生素同时分析尤为重要。目前，用于分析抗生素的方法主要有液相串联质谱法及高效液相色谱法。 前者虽然具有更低的灵敏度，对样品的分离度要求不高，但是存在较强的基质效应，尤其是对复杂的粪 便样品，并且仪器的使用及维护成本很高。比较而言，在满足检出限要求的前提下，高效液相色谱法不 仅能实现很好地分离，准确进行定性和定量分析，还大大降低了分析成本。目前对粪便中抗生素的检测 分析研究中，普遍按抗生素种类建立检测方法，不同类别抗生素则需要调整流动相和检测器，不但加大 了工作量，并且延长了分析时间。为实现多种抗生素同时分析，本研究优化了固相萃取前处理以及高效 液相色谱检测方法，建立了相对简便、低成本、准确的多种抗生素同时分析的方法，对开展畜禽粪污多种 抗生素残留等相关研究具有重要意义。 2 实验部分 2．1仪器与试剂 Visiprep 萃取柱(