人(Human)血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1)-NEWA课件.pdf

本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断 分离。 本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断 本本试试剂剂盒盒只只能能用用于于科科学学研研究究，，不不得得用用于于医医学学诊诊断断 人（Human）血管内皮细胞粘附分子1（VCAM-1/CD106） 2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。 人（Human）血管内皮细胞粘附分子1（VCAM-1/CD106） 人人（（HHuummaann））血血管管内内皮皮细细胞胞粘粘附附分分子子11（（VVCCAAMM--11//CCDD110066）） ELISA检测试剂盒 3. 细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。 ELISA检测试剂盒 EELLIISSAA检检测测试试剂剂盒盒 使用说明书 4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟 检测原理 检测原理 检检测测原原理理 取上清。 试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预 5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于 先包被血管内皮细胞粘附分子1（VCAM-1/CD106）抗体的包被微孔中， -20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。 自备物品 自备物品 依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。 自自备备物物品品 用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的 1. 酶标仪（450nm） 作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的血管内皮细胞粘 2. 高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL 附分子1（VCAM-1/CD106）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测 3. 37℃恒温箱 操作注意事项 操作注意事项 定吸光度（OD 值），计算样品浓度。 操操作作注注意意事事项项 样品收集、处理及保存方法 样品收集、处理及保存方法 样样品品收收集集、、处处理理及及保保存存方方法法 1. 试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的 1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞 浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解 刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地 后再使用。 2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。 冲液加19份的蒸馏水。 洗板方法 洗板方法 3. 浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明 洗洗板板方方法法 书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。 1. 手工洗板：甩尽孔内液体，每孔加满洗涤液，静置1min后甩尽 4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。 孔内液体，在吸水纸上拍干，如此洗板5次。 5. 所有液体组分使用前充分摇匀。 2. 自动洗板机：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。 试剂盒组成 操作步骤 试剂盒组成 操作步骤 试试剂剂盒盒组组成成