磷酸盐缓冲溶液对邻二氮菲_Fe_2_氧化法测定羟基自由基影响.pdf

DOI ：CNKI:22-1662/O41324.059 网络出版时间：2011-09-28 13:24 网络出版地址：/kcms/detail/22.1662.O41324.059.html 磷酸盐缓冲溶液对邻二氮菲-Fe2+氧化法测定羟基 自由基的影响 陈健，欧阳 ，闫静* （黑龙江中医药大学，黑龙江 哈尔滨 150040） 摘要：文章考察了不同浓度、不同体积的 pH 7.4 磷酸盐缓冲溶液对邻二氮菲-Fe2+ 氧化法检测羟基自由基体系的影响。将 pH 7.4 浓度分别为 0.1mol/L、0.15mol/L 和 0.2mol/L 的磷酸盐缓冲溶液加入邻二氮菲-Fe2+体系中，随着各自缓冲溶液加 入量的增加，其△A536 不断减小，当加入量超过 3mL 时，△A536 基本保持不变。 采用抗坏血酸清除含有不同浓度磷酸盐缓冲溶液的邻二氮菲-Fe2+体系，实验结 果表明，缓冲溶液浓度和加入量的不同，对于测定体系中清除羟基自由基的作用 结果有影响。因此，邻二氮菲-Fe2+氧化法测定羟基自由基需明确体系中磷酸盐 缓冲溶液的浓度及用量，在明确的统一体系中，才能进行有效的比较。 关键词：磷酸盐缓冲溶液；邻二氮菲-Fe2+ ；羟自由基 邻二氮菲-Fe2+氧化法是一种羟基自由基清除能力的测定方法，它以邻二氮 菲-Fe2+ 为氧化还原指示剂，因其呈色的变化而反映出溶液中氧化还原状态的改 变。体系中通过 Fenton[1]反应产生的 HO·，可使邻二氮菲-Fe2+水溶液氧化为邻二 氮菲-Fe3+ ，从而使邻二氮菲-Fe2+在 536nm 处的最大吸收峰消失，由此计算体系 中HO·的量变化。HO·在机体内的含量过多，会导致机体衰老从而引起疾病的发 [2] 2+ 生 。近年来，邻二氮菲-Fe 氧化法广泛地应用在抗氧化剂的筛选以及抗氧化性 的测定中。在众多研究文献中[3-5] ，均已明确采用 pH7.4 的磷酸盐缓冲溶液,但在 此法的应用中，对所使用的 pH7.4 磷酸盐缓冲溶液的浓度以及用量尚无明确标准 [6-10] 。本实验对邻二氮菲-Fe2+氧化法中磷酸盐缓冲溶液的浓度及用量对测定羟基 自由基清除率的影响进行了初步的研究。 1 1 实验材料 1.1 仪器 紫外可见分光光度计 （UV-1601 型，日本岛津公司），恒温水浴锅。 1.2 试剂 作者简介：陈健 （1985- ），女，主要从事中药及天然产物的化学研究。电话 E-mail:cj6717764@163.com. 通讯作者：闫静 （1962- ），女，教授，博士学位，主要研究领域为有机药物合成和药物质谱 学。电话 E-mail:yanjing_002@163.com. 邻二氮菲，抗坏血酸（Vc ），硫酸亚铁，0.01%H O ，无水乙醇，Na HPO ·12HO 2 2 2 4 2 以及NaH PO4·2HO，试剂均为分析级。