2_氯三苯甲基氯树脂的制备和其在多肽固相合成中的应用.pdf

第 9 卷第 3 期 过 程 工 程 学 报 Vol.9 No.3 2009 年 6 月 The Chinese Journal of Process Engineering June 2009 2-氯三苯甲基氯树脂的制备及其在多肽固相合成中的应用 1,2 1,2 1 1 李 鹏 ， 梁 洪 ， 张 竞 ， 苏志国 (1. 中国科学院过程工程研究所生化工程国家重点实验室，北京 100190 ；2. 中国科学院研究生院，北京 100049) 摘 要：以2-氯二苯甲酮为原料，与 PCl5 在 130∼140 ℃下加热合成 1-氯-2-二氯苯甲基苯作为前体，与粒径小于 30 µm 的 1.5%二乙烯苯交联聚苯乙烯树脂进行 Friedel−Crafts 烷基化反应，所得 2-氯三苯甲基醇用亚硫酰氯进行氯化处理， 得到 2-氯三苯甲基氯树脂. 该制备方法简便易行且无需使用有机金属试剂，所得 2-氯三苯甲基氯树脂首位氨基酸上载 率和溶胀性质均优于同类树脂商品，使用该树脂合成的困难序列酰基载体蛋白 65-74 的固相合成收率为72%，产物纯 度达到 76.5%. 关键词：2-氯三苯甲基氯树脂；多肽固相合成；聚苯乙烯树脂 中图分类号：O636 ；TQ464.7 文献标识码：A 文章编号：1009−606X(2009)03−0558−05 1 前 言 本研究采用 2-氯二苯甲酮作为原料，通过简便的氯 多肽的全化学合成分为液相和固相合成，固相多肽 化 方 法 制 得 1- 氯 -2- 二 氯 苯 甲 基 苯 {1-Chloro-2- 合成(Solid Phase Peptide Synthesis, SPPS)法自 1963 年由 [dichloro(phenyl)methyl]benzene, DCPB}作为前体，再与 Merrifield[1]创立以来，因其操作简便、副产物少、纯化 聚苯乙烯进行 Friedel−Crafts 烷基化反应，在树脂上得 效率高等优点，被越来越多地用于生物活性肽类的研究 到 2-氯三苯甲基醇(2-Chlorotritylalcohol, 2-CTA)，然后 开发，特别是广泛用于药用短肽的实际生产中[2]. 在多 通过氯化反应得到 2-CTC 树脂( 图 1). 该方法反应条件 肽固相合成中，2-氯三苯甲基氯(2-Chlorotritylchloride, 温和，处理过程易操作且无需使用有机金属试剂，仅用 2-CTC)树脂因反应条件较其他树脂更温和[3] 、能有效抑 3 步得到 2-CTC 树脂. 采用 MS, NMR, FT-IR, SEM 等方 制外消旋作用及二酮哌嗪生成等副反应的发生[4−6] 、产 法对 DCPB 和 2-CTC 树脂进行检测，通过对所制树脂 物纯度高等优点，已应用于多种多肽药物如细胞融合酶 的溶胀性质、首位氨基酸上载率及多肽固相合成效率的 抑制肽 T20 和 T1249 等的工业化生产[7,8]. 此外 2-CTC 检测考察其应用性能. 采用该方法制备的小粒径 2-CTC 树脂还可用于羧酸、醇和硫醇的固相合成[9] ，广泛的用 树脂的多肽固相合成载体性能达到相应商品化树脂的 途和优良的性能决定了其不再只是实验室常用的合成 水平，为安全简便地进行 2-CTC 树脂的大规模生产奠定 载体，而将逐渐成为大批量使用的生产用载体树脂. 了一定基础. 目前在聚苯乙烯载体上引入 2-CTC 结构的方法主 要有 3 种，一是通过碘代苯聚合物和正丁基锂衍生得到