食品科学论文外文翻译(水解蛋白)中文译文教学.pdf

核桃（核桃L.）水解蛋白的抗氧化肽的分离纯化和鉴定 a,b a,b a,b a,b a,c 陈宁 杨红梅 孙毅 牛军 刘淑莹 a 张俊应用化学研究所，中国科学院研究所，人民街5625 号，长春 130022，中华人民共 和国 b 中国社科院研究生院，北京100039，中国人民共和国 c 长春中医大学，长春，中国人民共和国 文章信息： 二零一二年八月二十八日收到稿件 二零一二年九月十四日收到修改稿件 二零一二年九月十四日得到公认 二零一二年九月二十六日在线可用 关键词： 核桃蛋白水解物、清除自由基的活性、纯化、抗氧化肽 摘要： 通过使用三种不同的蛋白酶水解核桃中的蛋白质，来得到抗氧化剂。使用1,1 - 二苯基-2 - 苦肼（DPPH）法来测水解物的抗氧化活性。 其中胃蛋白酶水解物，水解3 小时获得具有最高的抗氧化活性，因此可以抑制羟基自由基， 亚铁离子螯合物，具有还原性与抑制过氧化脂质的能力。 然后，3 小时的胃蛋白酶水解产物顺序通过超滤，凝胶过滤和反相高效液相色谱法纯化。具 有最高的抗氧化活性的肽序列被检测为丙氨酸 - 天冬氨酸 - 丙氨酸 - 苯丙氨酸（423.23 Da）的RP-HPLC-ESI-MS，这首次被认定为来自核桃蛋白水解物。 最后，肽对脂质过氧化抑制作用类似于对还原型谷胱甘肽（GSH ）的作用。这些结果也表 明蛋白水解产物和/或其有效分离的肽可以用作食品添加剂。 1 介绍 生物分子的氧化一直被被认为是自由基介导的过程，在所有生物体都是一个重要的反 应。自由基是原子，分子或离子的未成对电子或开壳层结构，如羟基自由基（•OH ），超氧 阴离子自由基（O2• - ）[6,34] 。过量自由基的合成，可导致细胞损伤和死亡，从而导致许 多疾病，如癌症，中风，心肌梗死，糖尿病和主要障碍[2,4,21] 。因此，重要的是要抑制的 过度自由基形成。 许多合成抗氧化剂如丁基化羟基苯甲醚（BHA），丁基羟基甲苯（BHT），没食子酸丙 酯已被用来清除自由基[28,32] 。然而，使用合成抗氧化剂已很可能威胁健康造成肝损伤和 致癌作用[9,23]。因此，人们在从源代码中发现的天然抗氧化剂的兴趣与日俱增。许多蛋白 质水解物中的肽合物，如大豆蛋白[5,15]，鹰嘴豆蛋白[12,34]，小麦蛋白[18,35]，油菜籽蛋 白质[17]，水稻胚乳中的蛋白质[33]，鱼蛋白[10,23,24,29,32]，蛋清蛋白[4,7]和牛蛙的皮肤 [20]的抗氧化能力已得到评估。这些水解物的抗氧化性能归于许多性能的共同作用。包括他 们清除自由基的能力，作为金属离子螯合剂，氧淬灭剂或供氢，抑制脂质过氧化的能力 [4,12,15] 。一般肽包括 3-20 个氨基酸残基，并且它们的活性依赖于组成，结构和疏水性 [4,5,19,26,27] 。 核桃（核桃L.）是世界上最普遍坚果树[14]。这是营养密集的食物，主要是由于其脂肪 含量以及蛋白质，维生素和矿物质的比例构成。一些生物活性，如抗动脉粥样硬化，抗炎和 抗突变特性和抗氧化活性[14]，核桃中的以上成分一直被报道。多酚和维生素E 被认为是抗 氧化活性[1,3]的主要来源。然而，很少有实验尝试评估核桃蛋白的抗氧化活性。 在本研究中，蛋白质水解物和它们的核桃隔离的肽进行了调查。此外，针对不同的自由 基，其抗氧化效果进行了测试。利用超滤，凝胶过滤色谱法和反相高效液相色谱法 （RP-HPLC）纯化抗氧化肽。通过LC-MS/MS 确定肽的序列。 2 材料与方法 2.1 材料 核桃是从中国吉林省当地市场购买的，中性蛋白酶和碱性蛋白酶从诺维信公司（北京， 中国）采购。胃蛋白酶获得来自鼎国生物技术有限责任公司（北京，中国）。DPPH （1,1 - 二 苯基-2 - 苦基偕腙肼）和GSH （L-谷胱甘肽减少），采购自西格玛化工有限公司的产品（圣 圣路易斯，密苏里州，美国）。乙腈（色谱纯）采购自费舍尔化工公司（NJ，USA）。所有 其他化学品所用试剂均为分析级。 2.2 核桃分离蛋白（WPI ）的产生 用石油醚研磨并脱脂的核桃在50◦C 时将脱脂粉在干燥烘箱干燥。然后将脱脂的四个分 散在比为 1:15 （重量/体积