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第 47 卷 第 3 期 复 旦 学 报 ( 自然科学版) Vol . 47 No . 3
2008 年 6 月 Journal of Fudan Univer sity (Natural Science) J un . 2008
( )
文章编号 : 0427 7 104 2008 03 03 11 07
毕赤酵母 YPS1 基因的失活对减少重组
人血清白蛋白降解的作用
1 1 2 1
陈 莹 ,袁汉英 ,李 海 , 吕 红
( 1. 复旦大学 生命科学学院 遗传学研究所 遗传工程国家重点实验室 ,上海 200433 ;
2 . 上海交通大学医学院附属仁济医院 上海市消化疾病研究所 ,上海 20000 1)
摘 要 : 重组人血清白蛋白在毕赤酵母系统的分泌表达产物除了完整的重组人血清 白蛋白外 ,还存在一约 45
ku 大小的主要降解片段 ,直接影响了重组人血清白蛋白的产量和后续的纯化研究. 为了减少重组人血清 白蛋白
的降解 ,采用同源重组的方法 ,使毕赤酵母中蛋白酶基因 YPS 1 失活 ,构建获得蛋白酶缺陷型菌株 ,研究 YPS 1
基因失活后对重组人血清白蛋白降解的影响. 结果表明 ,毕赤酵母 YPS 1 基因的失活有效地减少了重组人血清
白蛋白的降解 ,完整的重组人血清白蛋白在总蛋白中的比例由原来的60 %提高到 88 % ,降解片段由原先的40 %
降低到 10 %左右.
关键词 : 毕赤酵母 ; 重组人血清白蛋白; 蛋白降解 ; YPS 1 基因
中图分类号 : Q 36 文献标识码 : A
( )
人血清白蛋白 human serum albumin ,HSA 是由585 个氨基酸残基组成的单链无糖基化的球形蛋白
质 ,分子质量约为 67 ku ,它是人血浆中含量最高的蛋白质 , 由于其独特的药理作用和结构特征 ,使得它在
临床和生物产品中的应用非常广泛 , 因而在国内外都有很大的市场需求. 目前 ,利用基因工程技术 ,在毕
( )
赤酵母表达系统中分泌表达重组人血清 白蛋白 r HSA 的效果是最为理想的 ,并且已经应用于大规模生
( ) [ 1 ]
产 , 由日本绿十字公司 Green Cro ss 用毕赤酵母表达的重组人血清白蛋白已经上市 . 人血清白蛋白除了
( )
自身具有重要功能外 ,它与其他药物蛋白质组成的融合蛋白 如 HSA CD4 , HSA IFN 等 也备受关注 ,这
( ) [2 3 ]
类嵌合体血清融合蛋白可用来增加药物 如 CD4 , IFN 等 的半衰期以及在人体中的递送范围 . 近年
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